抗Axin的抗体C8的制备方法

摘要

抗Axin的抗体C8的制备方法，涉及一种抗Axin的抗体C8的制备方法。提供一种效价高、特异性强、能用于进行内源Axin的免疫印迹、免疫沉淀分析的抗Axin的抗体C8制备方法。先用PGR方法扩增出挪威鼠表达Axin 751－832氨基酸序列DNA片段，并连接到原核表达载体pGST parallel中构建重组质粒，再转化到大肠杆菌BL21菌株中，通过IPTG诱导，表达出融合有GST的Axin片断GST－Axin751－832；用谷胱甘肽－琼脂糖树脂纯化该抗原蛋白片断，4次免疫新西兰兔后，采血，纯化抗体血清。能快速大量获得抗原蛋白，抗体纯化方法独特，成本低，过程简单。其抗体效价高，特异性强。能检测到细胞内含量极其稀少的内源Axin。

主权项

1.抗Axin的抗体C8的制备方法，其特征在于其步骤为：首先用PCR的方法扩增出挪威鼠编码Axin751-832氨基酸序列的DNA片段，将该片段连接到原核表达载体pGST parallel中构建重组质粒，转化到大肠杆菌BL21菌株中，通过IPTG诱导，表达出融合有GST的Axin片断GST-Axin751-832；然后用谷胱甘肽-琼脂糖树脂纯化该抗原蛋白片断，4次免疫新西兰兔后，采血，纯化抗体血清，得到抗Axin的多克隆抗体。