发明名称 原子力显微镜诱导单分子DNA定位突变方法
摘要 一种生物技术领域的原子力显微镜诱导单分子DNA定位突变方法,在单分子水平上,通过原子力显微镜针尖的机械力定位扫描诱导DNA突变,包括以下步骤:(1)制备氨基硅烷修饰的云母衬底;(2)DNA样品的末端标记;(3)标记后DNA样品的拉直制备;(4)原子力显微镜对DNA进行诱导突变;(5)原子力显微镜对诱导后DNA片段的拾取分离;(6)分离后的DNA片段的单分子扩增;(7)琼脂糖凝胶电泳检测扩增情况;(8)扩增样品的DNA序列测定,筛选出突变样品。本发明具有精确定位,高分辨率,效率较高,操作简单,易于实行的优点。理论上可以诱导多点定位突变。
申请公布号 CN1766104A 申请公布日期 2006.05.03
申请号 CN200510029293.7 申请日期 2005.09.01
申请人 上海交通大学 发明人 安红杰;吕鸣;李海阔;张晓东;钮晓鸣;胡钧
分类号 C12N15/09(2006.01);C12N15/11(2006.01) 主分类号 C12N15/09(2006.01)
代理机构 上海交达专利事务所 代理人 王锡麟;王桂忠
主权项 1、一种原子力显微镜诱导单分子DNA定位突变方法,其特征在于,在单分子水平上,通过原子力显微镜针尖的机械力定位扫描诱导DNA突变,包括以下步骤:(1)制备氨基硅烷修饰的云母衬底;(2)DNA样品的末端标记;(3)标记后DNA样品的拉直制备;(4)原子力显微镜对DNA进行诱导突变;(5)原子力显微镜对诱导后DNA片段的拾取分离;(6)分离后的DNA片段的单分子扩增;(7)琼脂糖凝胶电泳检测扩增情况;(8)扩增样品的DNA序列测定,筛选出突变样品。
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