发明名称 |
原子力显微镜诱导单分子DNA定位突变方法 |
摘要 |
一种生物技术领域的原子力显微镜诱导单分子DNA定位突变方法,在单分子水平上,通过原子力显微镜针尖的机械力定位扫描诱导DNA突变,包括以下步骤:(1)制备氨基硅烷修饰的云母衬底;(2)DNA样品的末端标记;(3)标记后DNA样品的拉直制备;(4)原子力显微镜对DNA进行诱导突变;(5)原子力显微镜对诱导后DNA片段的拾取分离;(6)分离后的DNA片段的单分子扩增;(7)琼脂糖凝胶电泳检测扩增情况;(8)扩增样品的DNA序列测定,筛选出突变样品。本发明具有精确定位,高分辨率,效率较高,操作简单,易于实行的优点。理论上可以诱导多点定位突变。 |
申请公布号 |
CN1766104A |
申请公布日期 |
2006.05.03 |
申请号 |
CN200510029293.7 |
申请日期 |
2005.09.01 |
申请人 |
上海交通大学 |
发明人 |
安红杰;吕鸣;李海阔;张晓东;钮晓鸣;胡钧 |
分类号 |
C12N15/09(2006.01);C12N15/11(2006.01) |
主分类号 |
C12N15/09(2006.01) |
代理机构 |
上海交达专利事务所 |
代理人 |
王锡麟;王桂忠 |
主权项 |
1、一种原子力显微镜诱导单分子DNA定位突变方法,其特征在于,在单分子水平上,通过原子力显微镜针尖的机械力定位扫描诱导DNA突变,包括以下步骤:(1)制备氨基硅烷修饰的云母衬底;(2)DNA样品的末端标记;(3)标记后DNA样品的拉直制备;(4)原子力显微镜对DNA进行诱导突变;(5)原子力显微镜对诱导后DNA片段的拾取分离;(6)分离后的DNA片段的单分子扩增;(7)琼脂糖凝胶电泳检测扩增情况;(8)扩增样品的DNA序列测定,筛选出突变样品。 |
地址 |
200240上海市闵行区东川路800号 |