培养来自人体组织的癌细胞的方法和制备组织样品的装置

摘要

本发明涉及培养用于自然科学系列研究的癌细胞的方法，其中就污染物，正常细胞和肿瘤细胞而言为异质性的组织样品用顺序-平行分裂法局部分离，进一步分裂该局部分离的样品裂片，其中将该组织裂片的组织片段和液体分别置于给定的细胞培养基并在预定的培养条件下生长。本发明也涉及细胞培养基和将组织样品分裂成盘状裂片的装置。该本发明的方法连同该分裂装置和该培养基可以快速培养获自人组织的癌细胞，对所有类型的肿瘤的增裂率为100％。

主权项

1.一种培养来自人体组织的癌细胞的用于分子生物学的系列研究的方法，其特征为，基于涉及肿瘤细胞，正常细胞和污染物的异质结构将组织样品(6)通过顺序-平行机械切开而局部分离为盘状裂片，单个组织样品裂片分离，进一步分为组织片断，得到的局部分离的组织样品裂片(6a)的小的、分开的组织片断和组织液独立地在用生物基质涂覆并装满细胞培养基的细胞培养瓶中，在含氧气0.01-3％，含二氧化碳0.1-5％以及空气湿度为100％，温度为30℃-36.5℃条件下选择性培养，其中使用具有下列组成的细胞培养基：下列的无机盐：Ca(NO3)2 50mg/LCaCl2·2H2O 132mg/LKcl 400mg/LMgSO4·7H2O 150mg/LNaCl 6400mg/LNaHCO3 2100mg/LNa2HPO4 400mg/L下列的氨基酸：L-精氨酸·4HCl 100mg/LL-天冬酰胺，自由碱 38mg/LL-天冬氨酸 23mg/LL-胱氨酸 31mg/LL-谷氨酸 25mg/LL-谷氨酰胺 296mg/L甘氨酸 13mg/LL-组氨酸，自由碱 12mg/LL-羟脯氨酸 10mg/LL-异亮氨酸 38mg/LL-亮氨酸 38mg/LL-赖氨酸·HCl 35mg/LL-甲硫氨酸 12mg/LL-苯丙氨酸 16mg/LL-脯氨酸 22mg/LL-丝氨酸 26mg/LL-苏氨酸 22mg/LL-色氨酸 5mg/LL-酪氨酸 19mg/LL-缬氨酸 22mg/LL-丙氨酸 10mg/L下列的维生素：生物素 0.6mg/LD-泛酸钙 0.7mg/L盐酸胆碱 3.5mg/L叶酸 1.0mg/Li-肌醇 35.9mg/L烟酰胺 1.0mg/L吡哆醛·HCl 1.0mg/L核黄素 20μg/L硫胺素·HCl 1.0mg/L对氨基苯甲酸 500μg/L维生素B12 5μg/L烟酸 25μg/L抗坏血酸 50μg/L甲酰四氢叶酸 6μg/L脂酮酸 21μg/L维生素A，醋酸盐 100μg/L吡哆素·HCl 25μg/L烟酰胺 25μg/Lα-维生素E磷酸酯 10μg/L下列的其它组分：D-葡萄糖 1750mg/L酚红 7mg/L谷胱甘肽，还原型 0.5mg/L丙酮酸钠 1mM表皮生长因子，重组体 250ng/L胎牛血清 12.5％牛胰岛素，冻干 8mg/L(26U/mg)和抗生素。