5ˊ－核苷酸酶活性测定方法及5ˊ－核苷酸酶诊断试剂盒

摘要

本发明涉及一种测定5′－核苷酸酶活性的方法，同时本发明还涉及5′－核苷酸酶诊断试剂盒，属于医学检验测定技术领域。该试剂盒包括缓冲液、腺苷单磷酸、丙酮酸、乙醇、氧化型辅酶、丙酮酸氧化酶、过氧化氢酶、醛脱氢酶、稳定剂，通过将样品与试剂按一定的体积比混合，使之发生酶偶联反应，再将最终反应物置于生化分析仪下，检测主波长吸光度变化的情况(速度)，从而测算出5′－核苷酸酶的活性大小。采用本发明完全可以通过生化分析仪器得出所需的测定结果，并且灵敏度高、精确度好，不受内外源物质的污染，便于推广应用。

主权项

1.一种5′-核苷酸酶活性测定方法，步骤如下：1)、将样品与主要由腺苷单磷酸、丙酮酸、乙醇、氧化型辅酶、丙酮酸氧化酶、过氧化氢酶、醛脱氢酶组成的试剂混合，使之发生如下反应：腺苷单磷酸+水 5′-核苷酸酶 腺苷+磷酸根磷酸根+丙酮酸+氧+水 丙酮酸氧化酶 乙酰磷酸+ 二氧化碳+过氧化氢过氧化氢+乙醇 过氧化氢酶 乙醛+水乙醛+氧化型辅酶+水 醛脱氢酶 乙酸+还原性辅酶+氢离子2)、检测最终反应物在主波长340nm吸光度下降的速度，测算出5′-核苷酸酶的活性大小。