粪产碱杆菌青霉素G酰化酶在大肠杆菌中的高效表达

摘要

本发明公开了一种粪产碱杆菌青霉素G酰化酶(AfPGA)高效表达质粒psmlfpga的构建方法；利用该方法得到的质粒psmlfpga转化大肠杆菌宿主DH5α，得到大肠杆菌基因工程菌株CGMCC No.1023，其不需诱导便能高效表达AfPGA；本发明还公开了一种用于上述大肠杆菌基因工程菌的发酵培养基的配方，其采用糊精或淀粉作为发酵培养基主要碳源，可以大大提高重组蛋白的生产率；经摇瓶发酵，青霉素G酰化酶在DH5α/psmlfpga中的表达水平可达3500U/L。

主权项

1、含有粪产碱杆菌青霉素G酰化酶基因，即AfPGA基因，及其信号肽核苷酸序列的重组表达质粒psmlfpga，其特征在于，所述表达质粒由trc启动子、AfPGA基因及其信号肽核苷酸序列、四环素抗性基因和p15a复制子连接而成。