非酰胺化ω－芋螺毒素M ⅦA 及其制备方法和应用

摘要

本发明提供非酰胺化ω－芋螺毒素M VIIA(ω－CTX M VIIA)，是根据已知的ω－CTX M VIIA氨基酸序列，设计并合成编码非酰胺化ω－CTX M VIIA的DNA片段，对表达载体pPIC9进行Xho I/EcoR I双酶切，经连接构建成重组表达质粒pPIC9－CTX，用电穿孔法转化毕赤酵母，经筛选得到高产菌株，并由甲醇诱导表达。本发明在毕赤酵母中成功表达了非酰胺化的ω－CTX M VIIA，生产新型的非酰胺化的ω－CTX M VIIA，制备工艺简单稳定，生产成本较低。动物实验证明具有很高的镇痛活性，其镇痛效力是吗啡的900倍，可用于镇痛药物的开发。

主权项

1.非酰胺化ω-芋螺毒素M VIIA，其特征是：具有SEQ ID NO：1的氨基酸序列，分子量为2639，该多肽分子中Cys1与Cys16、Cys8与Cys20、Cys15与Cys25分别形成三对二硫键，C-端为非酰胺化Cys。