半乳糖化羟基磷灰石－多聚赖氨酸纳米粒的制备方法

摘要

一种半乳糖化羟基磷灰石－多聚赖氨酸纳米粒的制备方法，本发明的技术方案是：取羟基磷灰石纳米粒，用水洗涤除去游离离子对纳米粒表面ζ电位的影响。以高速离心收集沉淀，真空干燥，研磨。取羟基磷灰石纳米粒粉末沉淀悬浮于水中，超声波振荡，加入半乳糖化多聚赖氨酸溶液，混匀，搅拌。离心去上清，沉淀悬于去离子水中，即制得半乳糖化羟基磷灰石－多聚赖氨酸纳米粒混悬液。用本发明制得的羟基磷灰石－多聚赖氨酸纳米粒，实现了与DNA的高效结合。羟基磷灰石－多聚赖氨酸纳米粒DNA复合体内外给药，实现了靶向基因治疗与羟基磷灰石纳米粒子自身杀癌作用的“双重给药”，提高了纳米DNA复合体治疗肝癌的效果，为原发性肝癌的靶向基因治疗提供了理论依据和试验基础。

主权项

1、一种半乳糖化羟基磷灰石-多聚赖氨酸纳米粒的制备方法，设制备一份半乳糖化羟基磷灰石-多聚赖氨酸纳米粒，其步骤是：取多聚赖氨酸200mg，alpha-乳糖800mg，氰硼酸钠500mg共溶于200ml去离子水中，电热恒温水浴箱37℃反应24h，应用精密酸度计向反应液中加入适当NaOH溶液将PH调至8.5，37℃继续反应6h，反应液室温下用水透析终止反应去除未反应的乳糖，过SephadexG-25柱纯化，纯化产物真空干燥；取适量羟基磷灰石纳米粒，用去离子水洗涤5次，除去游离离子对纳米粒表面ζ电位的影响，以高速离心收集沉淀，100℃真空干燥24h，再用匀浆器充分研磨；精密称取羟基磷灰石纳米粒粉末2mg，沉淀悬浮于2ml 1mol/l Na2CO3溶液中，超声波振荡15min，加入300μl 0.1％的半乳糖化多聚赖氨酸溶液，充分混匀，在4℃温度下连续搅拌24h，离心去上清，沉淀悬于1ml PH＝7.4的PBS中，即制得半乳糖化羟基磷灰石-多聚赖氨酸纳米粒混悬液。