发明名称 产生猪内源性反转录病毒(PERV)外膜蛋白单株抗体之融合瘤细胞株及其所产生之单株抗体及彼等之用途
摘要 产生猪内源性反转录病毒(PERV)外膜蛋白单株抗体之融合瘤细胞株及其所产生之单株抗体及彼等之用途本发明系有关一融合瘤细胞株,其可制造结合至猪内源性反转录病毒(porcine endogenous retrovirus;PERV)外膜蛋白之单株抗体。本发明亦揭示该融合瘤之制法,利用单株抗体检测PERV之方法,以及包含该单株抗体之试剂套组及医药组合物。
申请公布号 TWI249407 申请公布日期 2006.02.21
申请号 TW091109797 申请日期 2002.05.10
申请人 财团法人台湾动物科技研究所 发明人 张荏婷;林孟雪;王仕蓉;江贞仪;张晃猷
分类号 A61K39/395;C12N5/12;G01N33/50 主分类号 A61K39/395
代理机构 代理人 陈长文 台北市松山区敦化北路201号7楼
主权项 1.一种融合瘤细胞株,其可制造结合至猪内源性反 转录病毒(PERV)外膜蛋白C-端之保守区域之单株抗 体;其中该单株抗体具有寄存于食品工业发展研究 所,寄存编号为CCRC 960146之融合瘤细胞株所产生之 单株抗体之结合特性。 2.根据申请专利范围第1项之融合瘤细胞株,其为寄 存于食品工业发展研究所,寄存编号为CCRC 960146之 融合瘤细胞株。 3一种单株抗体,其系由申请专利范围第1项之融合 瘤细胞株所产生。 4.根据申请专利范围第3项之单株抗体,其系由寄存 于食品工业发展研究所,寄存编号为CCRC 960146之融 合瘤细胞株所产生。 5.一种制备如申请专利范围第1项之融合瘤细胞株 之方法,其主要包括下列步骤: a.制备纯化之PERV外膜蛋白融合蛋白; b.将该PERV外膜蛋白融合蛋白注射于动物体内; c.取出该动物脾脏细胞与骨髓瘤细胞株进行融合; d.筛选可产生PERV外膜蛋白单株抗体之融合瘤细胞 株。 6.一种检测样品中PERV存在之方法,其包括: a.将样品与如申请专利范围第3项之单株抗体或其 抗原结合片段接触; b.藉免疫反应分析检测是否样品中有PERV的存在。 7.根据申请专利范围第6项之方法,其中该样品为血 液或细胞溶液。 8.根据申请专利范围第6项之方法,其中该单株抗体 为寄存于食品工业发展研究所,寄存编号为CCRC 960146之融合瘤细胞株所产生。 9.根据申请专利范围第6项之方法,其中该免疫反应 分析为萤光免疫分析、放射免疫分析及酵素免疫 分析。 10.一种用于检测PERU之测试套组,其包括如申请专 利范围第3项之单株抗体。 11.根据申请专利范围第10项之套组,其中该单株抗 体为寄存于食品工业发展研究所,寄存编号为CCRC 960146之融合瘤细胞株所产生。 12.根据申请专利范围第10项之套组,其中该套组为 免疫分析套组。 13.根据申请专利范围第12项之套组,其中该免疫分 析为萤光免疫分析、放射免疫分析及酵素免疫分 析。 图式简单说明: 图1为猪内源性反转录病毒外膜蛋白基因(PERV ENV) 之胺基酸序列比对分析。 图2为PERV外膜蛋白单株抗体制备流程图。 图3为利用西方杂交分析试验,确认筛选之融合瘤 细胞(PERV-8E10)所分泌的抗体。 图4为本发明单株抗体之类型化(typing)。 图5为本发明单株抗体经SDS-PAGE电泳分析后,以考马 西蓝染色之结果。 图6为利用酵素连结免疫分析法,检测本发明单株 抗体之力价。 图7为利用酵素连结免疫分析法,检测本发明单株 抗体之敏感性。 图8为利用西方杂交分析法,检测本发明单株抗体 之敏感性。 图9为利用本发明单株抗体,以西方杂交分析法进 行PERV病毒检测。 图10为利用本发明单株抗体,以细胞免疫染色法进 行PERV病毒检测。 图11为利用本发明单株抗体进行猪场工作人员之 PERV抗原检测。
地址 苗栗县竹南镇顶埔里台糖1号