逆流色谱法从柿叶中分离制备熊果酸及其衍生物的方法

摘要

本发明公开了一种逆流色谱法从柿叶中分离制备熊果酸及其衍生物的方法。方法步骤为：1)配制构成固定相、流动相的两相溶剂系统；2)使逆流色谱仪柱子中充满固定相；3)使逆流色谱仪的主机转动；4)将流动相泵入逆流色谱仪柱内；5)由进样阀进入原料，根据检测器谱图或薄层层析方法检测获得熊果酸及其衍生物。本方法适用于对各种途径获得的柿叶粗提物提纯，适用于用各种型号的逆流色谱仪分离制备熊果酸、3α，19α，24－三羟基乌索－12－烯－28－酸、3β，19α，24－三羟基乌索－12－烯－28－酸和3β，24－三羟基乌索－12－烯－28－酸，纯度可达到98％以上，能直接进大量粗品或合成混合物，能达到很好的分离效果。

主权项

1、一种逆流色谱法从柿叶中分离制备熊果酸及其衍生物的方法，其特征在于，方法的步骤如下：1)采用烷烃∶脂肪酯∶脂肪醇∶水的体积比为1-10∶1-20∶1-10∶1-10的溶剂系统；柿叶的提取物经精制、提纯和结晶除去大部分熊果酸后，滤液蒸干所得固体为原料；2)按上述体积比配制溶剂系统置于分液漏斗中，摇匀后，静置分层，等平衡一段时间后，将上、下相分开；3)用上相作固定相，下相作流动相或用下相作固定相，上相作流动相；用上相作为固定相，充满整个逆流色谱仪中的色谱柱子，调整主机正转，将下相流动相从柱子的首端泵入柱内进行洗脱，待整个体系建立动态平衡后，由进样阀进样；用下相作为固定相，充满整个逆流色谱柱子，调整主机正转，将上相流动相从柱子的尾端泵入柱内进行洗脱；待整个体系建立动态平衡后，由进样阀进样；4)根据检测器的谱图或薄层层析检测，经重结晶分别得到熊果酸及其衍生物(3α，19α，24-三羟基乌索-12-烯-28-酸、3β，19α，24-三羟基乌索-12-烯-28-酸和3β，24-三羟基乌索-12-烯-28-酸)。