从马蹄粉产粉废水中提取抑菌物质的方法

摘要

本发明涉及一种抑菌物质的提取工艺。特别涉及从马蹄粉产粉废水中提取抑菌物质的方法。即将产粉废水沉降后取得的浆状物经过离心、干燥制得抑菌物粗品；再将此粗品用乙醇、甲醇浸提，低温减压蒸馏得乙醇浸提物；以水悬浮此物，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇三种有机溶剂分别通过两相萃取分部，各部再次通过低温减压蒸馏制得提取物；最后各部提取物经过柱层析纯化后，分别得到抑菌活性组分A、B、C，合并后得到纯度较高的抑菌活性物质。该抑菌物质对食品中常见污染菌及致病菌具有明显的抑制及杀灭作用，且其自身有较高的稳定性。

主权项

1、从马蹄粉产粉废水中提取抑菌物质的方法，其特征在于将马蹄产粉后的废水自然沉降1～2天，取其底部的浆状物，离心处理至浆状物分层明显，去上清液层及下层淀粉层，将中间层部分于50～55℃干燥成块，即为抑菌活性成分粗品；将抑菌粗品用40％～85％的乙醇或纯甲醇于50～70℃水浴浸泡2～3小时，以充分浸提有效物质，或者用95％的乙醇或纯甲醇直接浸泡1周，反覆浸提2～3次，充分提取有效物质；用定性滤纸过滤上述浸提液，以相应的浸提有机试剂洗涤滤渣2～3次，合并滤液；将滤液于低于50℃，0.1大气压下蒸馏至膏状，得乙醇提取物；加入2倍体积的水于此提取物中，搅拌制成悬浮液，然后依次用极性从小到大的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇三种有机溶剂通过两相萃取分部，每次有机溶剂的用量均为所制成悬浮液体积的五倍，经多次萃取至悬浮液无色，得到四个部分，石油醚部分、乙酸乙酯部分、正丁醇部分和水部分，各部分再次通过低于50℃，0.1大气压蒸馏去有机试剂得到各部分提取物；石油醚部分的提取物无抑菌性，弃去；对乙酸乙酯部分的提取物进行200～300目硅胶柱层析，以提取物与吸附剂体积比1∶8的比例来装柱，用石油醚∶乙酸乙酯混合体系来洗脱，浓度梯度体积比为9.5∶0.5，9∶1，8∶2，7∶3，5∶5，3∶7，2∶8，9∶1，每个浓度梯度均配300ml洗脱液，每100ml收一个流份，共24个流份，将17～19的流份合并，于低于50℃，0.1大气压蒸馏得到抑菌活性组分A；对正丁醇部分的提取物进行200～300目硅胶柱层析，以提取物与吸附剂体积比1∶8的比例来装柱，用氯仿∶甲醇混合体系来洗脱，浓度梯度体积比为9∶1，8.5∶1.5，8∶2，7∶3，6∶4，5∶5，0∶10每个浓度梯度均配300ml洗脱液，每100ml收一个流份，共21个流份，将5～11的流份合并，于低于50℃，0.1大气压蒸馏得到抑菌活性组分B；对水部份的提取物进行200～300目硅胶柱层析，以提取物与吸附剂体积比1∶8的比例来装柱，用氯仿∶甲醇混合体系来洗脱，浓度梯度体积比为9∶1，8.5∶1.5，8∶2，7∶3，6∶4，5∶5，0∶10每个浓度梯度均配300ml洗脱液，每100ml收一个流份，共21个流份，将6～8的流份合并，于低于50℃，0.1大气压蒸馏得到抑菌活性组分C；将活性组分A、B、C混合，得到纯度较高的抑菌活性物质。