藉由醱酵经构筑之产制胺基酸的细菌以制备胺基酸之方法

摘要

一种制造具有改良胺基酸-或核酸生产力之棒状杆菌的方法，包括在一棒状杆菌染色体上的胺基酸-或核酸-生物合成基因的启动子序列中发生突变而使其接近一致序列，或以基因重组作用在一棒状杆菌染色体上的胺基酸-或核酸-生物合成基因的启动子序列中导入一个变化而使其接近一致序列，进而取得此产制胺基酸-或核酸之棒状微生物的突变株，培养基这些突变株并筛选能大量产制胺基酸或核酸的突变株。这些方法可构筑一突变株，不需要利用质体就能适当加强或控制指定基因的表现，且能经由重组作用或突变作用产制高产量的胺基酸。

主权项

1.一种藉由醱酵产制麸胺酸之方法,其包含下述之 步骤: a)藉由基因重组于棒状杆菌之染色体上的柠檬酸 合成(CS)基因之启动子序列中导入突变以使该启 动子序列接近一致序列,以得到具有改良之胺基酸 生产力之棒状杆菌; b)于培养基中培养所得到之棒状杆菌并因此于该 培养基中累积胺基酸;及 c)自该培养基中收集该胺基酸, 其中该细菌之CS基因的突变或改变之启动子序列 具有至少1个选自下述之序列: i)位于-35区域之TTGACA序列以替代野生型序列ATGGCT; ii)位于-10区域之TATAAT或TATAAC序列以替代野生型序 列TATAGC;及 iii)i)和ii)之组合。 2.一种源自棒状杆菌的经分离之柠檬酸合成(CS) 基因,其具有启动子,该启动子含有至少1个选自下 述之序列: i)位于-35区域之TTGACA序列以替代野生型序列ATGGCT; ii)位于-10区域之TATAAT或TATAAC序列以替代野生型序 列TATAGC;及 iii)i)和ii)之组合。 图式简单说明: 图1显示含有突变启动子之GDH基因的构筑流程。 图2显示含有突变启动子之CS基因的构筑流程。 图3显示携带1acZ为报告基因之穿梭载体的构筑流 程。