无蛋白培养基中获得细胞系的方法以及用此方法获得的细胞系

摘要

本发明涉及一种获得适应无血清和蛋白的培养基的哺乳动物细胞的方法。本发明方法包括由两个适应步骤组成的过程，包括临界蛋白浓度间隔，其中细胞必须获得在无蛋白质的培养基中存活的能力。对于每一细胞系有特定的临界蛋白浓度间隔。而且，本发明中也公开了哺乳动物细胞系，其在无血清和蛋白的培养基中至少稳定生长40代。本发明进一步涉及克隆，所述克隆表达抗－CD6 T1hT和EGFhR₃抗受体人源化的抗体和抗－CD₃T₃Q嵌合抗体以及所述抗体的片段。

主权项

1.一种获取适应在无血清和蛋白质的培养基中生长的哺乳动物细胞系的方法，它包括两个阶段：I.第一阶段，其中细胞系活力介于80和100％之间，并且细胞生长在蛋白浓度连续降低的培养基中，其中该蛋白浓度一直降至某一临界蛋白浓度，在该临界蛋白浓度时细胞活力降至0％，II.第二阶段，其中临界蛋白浓度一旦预先确定下来，则确定临界前浓度为细胞能在其中生长的蛋白浓度，并将它作为缓慢降低蛋白浓度直到细胞培养物达到初始细胞活力和倍增时间的起始点。