酵母重组株及IFNα－la干扰素的纯化方法

摘要

本发明涉及分泌表达α-1a干扰素的酵母工程菌株IFNα-1a/pGAPZα-A/GS115构建的关键技术、构建结果及利用它来生产α-1a干扰素的纯化方法。本发明采用酵母分泌表达系统取代大肠杆菌包涵体表达系统，目标蛋白α-1a干扰素不需要复性，其生物比活性可达到1.0×10⁹单位/毫克蛋白，低毒副作用；在纯化过程中，不需要价值昂贵的单抗柱，即可从发酵液中提取获得纯度达95％以上的目标蛋白α-1a干扰素，降低了生产成本。

主权项

1、一种酵母重组株，其特征在于将去除了启始密码子ATG的人α-1a干扰素基因插入pGAPZα-A之GAP启动子/α-factor信号肽下游xhoI/xbaI位点，同时删除载体Kex2位点之后的四个氨基酸Glu-Ala-Glu-Ala，构建成人α-1a干扰素基因分泌型表达载体rhIFNα-1a/pGAPZα-A，转入毕赤氏酵母Pichia pastoris的菌珠GS115，构建成分泌型人α-1a干扰素的酵母重组株rhIFNα-1a/pGAPZα-A/GS115。