基因表达的定量

摘要

本发明涉及测定样品中靶核酸的数量的方法，其中将使用的标准物设计成与目标基因或“靶核酸序列”相比具有一个碱基的差异。使用这种标准物与方法结合来“增加”标准物和测试的核酸样品中的差异，其中利用例如，正好在突变位点进行的碱基延伸反应而容许以相同的效率扩增标准物和靶核酸，从而有助于定量靶核酸。此后使用定量“增加”的标准物和靶核酸样品的方式来确定靶核酸的数量。在优选的实施方案中，该定量方式是质谱法。

主权项

1.一种测定生物样品中靶核酸序列的数量的方法，包括下列步骤：a)通过加入已知量的标准核酸来制备样品，该标准核酸具有与包含靶核酸的生物标本的靶核酸序列相比至少有一个碱基不同的核苷酸序列，由此在靶和标准核酸之间产生区别位点；b)扩增步骤a)的样品；c)增加该标准和该靶核酸序列之间在区别位点处的差异；以及d)通过测量扩增的靶核酸与扩增的标准核酸的比率来定量步骤c)的增加的产物，以测量存在于生物样品中的靶核酸序列的数量。