从枣中提取环磷酸腺苷（cAMP）工艺

摘要

本发明提供了从枣中提取环磷酸腺苷(cAMP)的工艺。大枣经洗净、晾干、去核后按比例添加蒸馏水浸泡24－48小时后匀桨，高速冷冻离心，取上清液反复经离子交换柱层析，进行分离、纯化、冷冻干燥成冻干粉末。本发明与现有技术相比具有：1.成本低廉：由于本工艺提取环磷酸腺苷(cAMP)所用原料为枣，以静海枣为例，其含量为749nmol/g，按70％收率计算，每公斤95％纯度的环磷酸腺苷(cAMP)成本约为5万元人民币，其成本明显低于合成方法制备的环磷酸腺苷(cAMP)；2.无毒副作用：枣属药食同源，既可做为干鲜果品食用又可作为中药材入药，因此本产品属纯天然产品，无毒副作用。

主权项

1、从枣中提取环磷酸腺苷(cAMP)工艺，其特征在于：本发明从枣中提取环磷酸腺苷(cAMP)的工艺是按照以下程序实现的：浸泡：枣经洗净、凉干、去核后称重，按500克添加蒸馏水5升比例，加蒸馏水浸泡24-48小时；匀浆：将上述浸泡液用组织捣碎机或组织匀浆机进行捣碎匀浆，每次连续3分钟，静止20分钟，反复进行3次，该步骤及以后各步骤均在4℃±1℃温度条件下进行；离心：将上述匀浆液用高速冷冻离心机在转速为12000g离心15分钟；取出上清液，取出上清液后的沉淀物再用2.5升蒸馏水按匀浆项下条件匀浆和按离心项下条件离心，上清液与前次合并；浓缩：将合并后的上清液用薄膜蒸发器或水浴锅蒸发，使其最后体积为1000ml左右；第一次柱层析：将上述浓缩后的上清液通过阴离子交换树脂柱进行离子交换柱层析；开始用少许蒸馏水洗脱下来深棕色液体弃去后，收集用0.05N甲酸洗脱下来的浅黄色液体。调整酸碱度(pH)：将上述收集的浅黄色液体用1N HN4OH调pH至中性(pH＝7)；第二次柱层析：上述呈中性洗脱液第二次通过阴离子交换树脂柱层析，洗脱液及其收集同第一次柱层析；氧化铝柱层析：将第二次柱层析洗脱液通过氧化铝柱层析，先用少许蒸馏水洗脱弃去棕色液体后用Tris缓冲液洗脱并收集洗脱液；第四次柱层析：上述洗脱液第三次通过阴离子交换树脂柱层析，洗脱液及其收集同第2次柱层析；冷冻干燥：将上述洗脱液用冷冻干燥机冷冻干燥成环磷酸腺苷(cAMP)冻干粉。