Método de seleção para desidratases dependentes de b12, sequências de ácido nucléico, desidratase mutante dependente de b12, método para a criação de mutantes de desidratase dependente de b12 e métodos para a identificação de desidratase dependente de b12

摘要

"MéTODO DE SELEçãO PARA DESIDRATASES DEPENDENTES DE B~ 12~, SEQuêNCIAS DE áCIDO NUCLéICO, DESIDRATASE MUTANTE DEPENDENTE DE B~ 12~, MéTODO PARA A CRIAçãO DE MUTANTES DE DESIDRATASE DEPENDENTE DE B~ 12~ E MéTODOS PARA A IDENTIFICAçãO DE DESIDRATASE DEPENDENTE DE B~ 12~" A presente invenção refere-se a seq³ências de desidratases dependentes de B~ 12~ com reações cinéticas aprimoradas, reduzindo, assim, a inativação do suicídio de enzimas na presença de glicerol e 1,3-propanodiol. Essas enzimas foram criadas utilizando-se PCR propenso ao erro e mutagênese dirigida a oligonucleotídeo para atingir o gene DhaB1, codificador da subunidade <244> do glicerol desidratase. Mutantes com reações cinéticas aprimoradas são rapidamente identificados utilizando-se testes de alta produtividade, também descritos no presente.