硒代木瓜蛋白酶的制备方法

摘要

本发明的硒代木瓜蛋白酶的制备方法属于生物化学领域，特别涉及制备具有高谷胱甘肽过氧化物酶活性的人工酶的方法。以木瓜蛋白酶、硒氢化钠为原料，工艺步骤分为硒化和后处理两步。所说的硒化，是用磷酸盐缓冲液溶解木瓜蛋白酶，再加入过量的硒氢化钠，氮气保护下进行硒化；所说的后处理，是硒化后冻干，干粉用磷酸盐缓冲液溶解，离心除硒后，经除盐，收集蛋白粉，冻干得硒代木瓜蛋白酶。硒化前可以进行活化处理。本发明具有如下特点：制备方法简单、步骤少；原料稳定、易得、成本低、分离提纯简单方便；制得的产物稳定性好，具有优良的抗氧化性，谷胱甘肽过氧化物酶活力高，适用于工业生产，具有药用潜力及工业应用价值。

主权项

1、一种硒代木瓜蛋白酶的制备方法，是以硒氢化钠为原料，工艺步骤为硒化和后处理两步；其特征在于，原料还有木瓜蛋白酶；所说的硒化，是用磷酸盐缓冲液溶解木瓜蛋白酶，再加入过量的硒氢化钠，氮气保护下硒化15～55小时，硒化的温度范围为20℃～45℃；所说的后处理，是硒化后取出冻干，干粉用磷酸盐缓冲液溶解，离心除硒后，经葡聚糖凝胶G-25除盐，收集蛋白峰，冻干，得硒代木瓜蛋白酶；所说的磷酸盐缓冲液，浓度范围是10～100mM，PH值5.0～9.0。