基于细胞的荧光共振能量传递(FRET)检测梭菌毒素

摘要

本发明提供一种测定梭菌毒素活性的方法，所述方法包括(a)将含有梭菌毒素底物的细胞与样品接触，所述梭菌毒素底物包括一种供体荧光团；一种吸收光谱与供体荧光团的发射光谱有重叠的受体；一种含有切割位点的梭菌毒素识别序列，其中所述切割位点介于供体荧光团和受体之间，并且其振能量传递在适当条件下表现于供体荧光团和受体之间；(b)激活供体荧光团；并(c)测定接触过的细胞相对于对照细胞的共振能量传递，其中与对照细胞相比，接触过的细胞共振能量传递的变化表示梭菌毒素的活性。

主权项

1.一种底物组合物，包括释放剂和梭菌毒素底物，所述梭菌毒素底物包括：(a)一种供体荧光团；(b)一种吸收光谱与所述供体荧光团的发射光谱有重叠的受体；(c)一种含有切割位点的梭菌毒素识别序列，其中所述切割位点介于所述供体荧光团和所述受体之间，并且其中共振能量传递在适当条件下表现于所述供体荧光团和所述受体之间。