精神分裂症相关基因TTR的多态性位点及其应用

摘要

本发明公开了一种与精神分裂症相关的基因TTR及其新发现的多态性位点，以及在检测精神分裂症方面的用途。本发明还提供了一种检测TTR基因的单核苷酸多态性的方法，并用上述方法在TTR基因的SEQ ID NO：1所示序列的第293位，SEQ ID NO：2所示序列的第224位、第265位、第322位和第352位检测到了四个新的单核苷酸多态性位点和一个9核苷酸缺失的位点。其中，位于第二号外显子293位的SNP1T→A的突变会造成氨基酸序列由谷氨酸到缬氨酸的改变，引起蛋白结构和功能的变化，等位位点A，即在其DNA互补链上为T等位位点，是产生精神分裂症的一个危险等位位点，其可应用于精神分裂症的诊断。

主权项

1、一种检测转甲状腺蛋白TTR基因多态性位点的方法，其特征在于包括如下步骤：1)用常规酚氯仿方法从人的血液中提取DNA，浓度校正至10ng/μl，作为DNA模板；2)设计寡核苷酸引物序列，用聚合酶链式反应扩增，反应体系为15μl，其中20μM正/反向引物0.3μl，2mM脱氧核苷酸1.5μl，含20mM镁离子的缓冲液1.5μl，DNA聚合酶0.15μl及DNA模板1.0μl和灭菌双蒸水10.25μl，退火温度为53度，退火时间为1分钟，扩增32个循环，得到TTR基因外显子区域的DNA序列；3)对扩增后得到的DNA序列进行测序，测序反应总反应体积5μl，PE ABI的Big Dye 3.1荧光标记的终止底物循环测序试剂混合物1μl，200ng基因组DNA，3.3pmol引物，循环参数：96℃，30s；50℃，30s；60℃，1min；循环30次，产物经乙酸钠/乙醇纯化后在DNA测序仪中进行自动测序，找出TTR基因外显子区域所有潜在的单核苷酸多态性位点。