牙鲆淋巴囊肿病毒中和单克隆抗体及其制备方法

摘要

本发明是由两株杂交瘤细胞分别分泌的淋巴囊肿病毒的中和单克隆抗体A和B，该两株杂交瘤培养细胞的名称分别为：小鼠杂交瘤细胞株LCDV－E1和小鼠杂交瘤细胞株LCDV－E2，该两杂交瘤细胞的保藏号分别为：CCTCC－C200419和CCTCC－C200420，该中和单抗A和B具有与淋巴囊肿病毒上的粘附蛋白结合，从而封闭该粘附蛋白，阻断该病毒的粘附蛋白与该病毒敏感细胞——牙鲆鳃细胞的细胞膜上的该病毒受体结合，阻止该病毒入侵细胞的功能；该单抗制备是以提纯淋巴囊肿病毒为抗原，经免疫学方法，建立抗淋巴囊肿病毒的单克隆抗体库，再应用中和实验测定方法筛选出中和单抗A和B。该两中和单抗对淋巴囊肿病毒病的诊断与治疗具有非常重要的应用价值。

主权项

1、一种由两株杂交瘤细胞分别分泌的淋巴囊肿病毒的中和单克隆抗体，其特征在于：分泌淋巴囊肿病毒中和单克隆抗体的该两杂交瘤培养细胞的名称分别为：小鼠杂交瘤细胞株LCDV-E1和小鼠杂交瘤细胞株LCDV-E2，该两杂交瘤细胞的保藏号分别为：CCTCC-C200419和CCTCC-C200420，其保藏日期：2004年12月14日；其分泌的特异性淋巴囊肿病毒中和单克隆抗体(简称：中和单抗A和中和单抗B)具有与淋巴囊肿病毒上的粘附蛋白结合，从而封闭该粘附蛋白，阻断该病毒的粘附蛋白与该病毒敏感细胞——牙鲆鳃细胞的细胞膜上的该病毒受体结合，阻止该病毒入侵细胞的功能；在倒置显微镜下观察，生长状态良好的该杂交瘤细胞分裂旺盛、外观饱满、浑圆、折光性强、细胞大小均一、贴壁良好；该杂交瘤细胞有无限分裂增生能力；长势良好的该杂交瘤细胞常规培养2-3天，其培养基由桃红色转变为黄色，该培养基中含有该杂交瘤细胞分泌的大量的淋巴囊肿病毒中和单克隆抗体；在中和实验中，该中和单抗A和中和单抗B中和效果明显，具有保护牙鲆鳃细胞不受淋巴囊肿病毒侵染特性。