抗溶血性链球菌、葡萄球菌及白色念珠菌1gG抗体及制备方法

摘要

本发明公开了一种特异性抗溶血性链球菌、葡萄球菌及白色念珠菌的鸡IgG抗体及其制备方法。它是使用溶血性链球菌、葡萄球菌及白色念珠菌的菌体和细菌碎片，制备成福氏完全佐剂免疫原和福氏不完全佐剂免疫原，经皮下多点免疫产蛋母鸡，从免疫的母鸡鸡蛋黄中应用水稀释法粗提取鸡IgG抗体，应用硫酸胺盐析法纯化鸡IgG抗体，获得抗溶血性链球菌、葡萄球菌及白色念珠菌鸡IgG抗体。使用本发明特异性抗溶血性链球菌、葡萄球菌及白色念珠菌鸡IgG抗体配制的制品，如：喷雾剂、气雾剂、滴鼻液、含片等，可以用于治疗由链球菌和葡萄球菌以及白色念珠菌引起的上呼吸道感染性炎症，如：急，慢性鼻炎、鼻窦炎、扁桃体炎、咽炎、喉炎、支气管炎等。

主权项

1、一种抗溶血性链球菌、葡萄球菌及白色念珠菌IgG抗体，其特征是它由以下方法取得：(1)免疫原制备：取致病的溶血性链球菌及溶血性链球菌菌体碎片50～70份，葡萄球菌及葡萄球菌菌体碎片20～40份、白色念珠菌及白色念珠菌菌体碎片10～20份混合成菌液；将等量体积的菌液与等量体积的福氏完全佐剂混合，搅拌乳化，制成油包水福氏完全佐剂溶血性链球菌、葡萄球菌及白色念珠菌免疫原；将等量体积的菌液与等量体积的福氏不完全佐剂混合，搅拌乳化，制成油包水福氏不完全佐剂溶血性链球菌、葡萄球菌和白色念珠菌免疫原；每毫升福氏完全佐剂免疫原和福氏不完全佐剂免疫原中，均含有细菌21亿～27亿；(2)免疫：将福氏完全佐剂免疫原皮下和肌肉多点注射给产蛋母鸡，每只产蛋母鸡注射1ml免疫原，然后每隔一周使用福氏不完全佐剂免疫原1ml皮下和肌肉多点注射给产蛋母鸡，使用福氏不完全佐剂免疫原加强免疫二次后，每隔三周再使用福氏不完全佐剂免疫原1ml皮下和肌肉多点注射给产蛋母鸡加强免疫二次，前后共免疫五次；(3)抗溶血性链球菌、葡萄球菌及白色念珠菌鸡IgG抗体粗提取物的制备：收集免疫30天后的免疫母鸡的鸡蛋，鸡蛋表面用酒精消毒，取蛋黄，去除蛋黄膜取蛋黄液，将蛋黄液与蒸馏水按体积比1∶7～9的比例加蒸馏水，充分搅拌，并用1N HCl调节酸碱度至pH5.0～5.2，在温度4℃下静置10小时；将蛋黄稀释液高速离心30分钟，取上清，将蛋黄稀释液上清置于截留分子量为100kDa的中空纤维超滤器中超滤浓缩5～8倍，然后加入0.02％～2.0％的葡萄糖酸氯己定充分搅拌，并使用1N NaOH调节酸碱度至pH7.0～7.5，并在温度4℃下静置10小时；此后高速离心15分钟，取上清，除去脂质物质，将上清经0.45μ～0.22μ的消毒微孔滤膜过滤除菌，即得抗溶血性链球菌、葡萄球菌及白色念珠菌鸡IgG抗体粗提取物。