合成多核苷酸的方法

摘要

本发明通过将具有能形成环的结构的多核苷酸用作模板，并联合使用多个能为该环提供互补链合成起点的引物，使等温和快速的多核苷酸合成成为现实。如果使用LAMP法，由于也可通过等温反应合成模板多核苷酸本身，因此可等温和快速进行所有反应。

主权项

1.合成多核苷酸的方法，其含有下列步骤：混合下列组分(1)至(5)，并在允许使用(4)中的DNA聚合酶进行依赖于模板的互补链合成的条件下进行保温：(1)：模板多核苷酸，其：(a)具有含有至少一套互补核苷酸序列的靶核苷酸序列，(b)当(a)中的互补核苷酸序列杂交时即形成能碱基配对的环，(c)通过使其3’-末端与其自身退火而形成环，和(d)与其自身退火的3’-末端可成为使用其自身为模板的互补链合成的起点；(2)：至少两种引物，所述引物可在模板多核苷酸环上的不同位置处提供互补链合成起点；(3)：至少一种引物，所述引物可在环中与2中所述的引物不同的位置处提供互补链合成起点，所述环是通过模板多核苷酸和/或使2中所述的引物与模板多核苷酸退火而产生的延伸产物形成的；(4)：催化伴随着链置换的互补链合成的DNA聚合酶；和(5)：互补链合成的底物。