嗜酸乳杆菌奶片的制备工艺

摘要

嗜酸乳杆菌奶片的制备工艺，采用诱变育种法选育抗高温突变型嗜酸乳杆菌菌株，即嗜酸乳杆菌LA201菌株；并从中草药的提取液和微生物培养液中发现能降低菌体死亡的物质，由于抗高温嗜酸乳杆菌菌株的成功选育和保护剂的发现，使得嗜酸乳杆菌奶片的生产，可采用普通奶粉生产的高温喷雾干燥设备，连续批量喷粉，然后按常规压片法压片成型，可制成含菌量大、菌活性高的嗜酸乳杆菌奶片。

主权项

1、一种嗜酸乳杆菌奶片的制备工艺，其特征在于：1)出发菌株的选择首先以从自然界中分离筛选的嗜酸乳杆菌菌株作为出发菌株；2)分别称取鳖甲、白扁豆、小蓟、三七、蒺藜、蛤蚧、莲子、韭菜籽、山药、小茴香、槐花、佩兰、桑叶、木贼、黄芪、酸枣仁、筚芨、菊苣或北沙参按1∶10的质量比加入饮用水中，浸泡25-35分钟，煮沸，然后在100℃保持25-35分钟，用200目滤布过滤，得滤液I；再按1∶10的质量比将过滤得到的药渣加入饮用水中，煮沸，然后在100℃下保持25-35分钟，用200目滤布过滤，得滤液II；将滤液I和滤液II按1∶1的质量比混合，即可得到鳖甲、白扁豆、小蓟、三七、蒺藜、蛤蚧、莲子、韭菜籽、山药、小茴香、槐花、佩兰、桑叶、木贼、黄芪、酸枣仁、筚芨、菊苣或北沙参的单个煎煮液；3)菌悬液的制备将出发菌株分别接种于上述单个煎煮液中，使其终浓度为1.0×106个/毫升，于37℃下培养2～3天，以7000转/分离心收集菌体，分别将得到的菌体与质量浓度为0.85％的无菌生理盐水混合，制成浓度为1.0×108个/毫升的菌悬液；4)诱变育种分别将菌悬液用20W的紫外线灯预热20分钟后取10毫升置于带有磁棒的培养皿中，将培养皿放置于诱变箱的磁力搅拌器上，在磁力搅拌下，用20W的紫外线灯照射15～30秒；照射完后置于黑暗处0.5小时后分别取1毫升接入20毫升煎煮液中，在30℃温度下振荡培养过夜，再于65～85℃温度下保温5～60分种，涂布或划线平板，于37℃温度下培养，待菌落长出后，进行筛选；5)高温型嗜酸乳杆菌菌株的筛选选择细胞杆形、短链或长链排列，革蓝氏染色阳性，菌落较小，微白色，湿润，圆形，直径为0.5mm，边缘似星状；生长温度范围为12～50℃，能发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖、麦芽糖、果糖产酸不产气，发酵糖的主要代谢产物为乳酸和微量的其他有机酸，属于同型乳酸发酵；能在4％氯化钠培养基中生长，耐酸耐胆汁盐，同时，所选菌株耐高温，即在65～85℃下能存活5～60分钟，能均匀凝固牛乳，凝乳组织细腻的高温型嗜酸乳杆菌1-2株；6)混合、干燥、压片将得到的高温型嗜酸乳杆菌接种于固形物含量为40～50％的浓缩乳中，使高温型嗜酸乳杆菌最终浓度为1.0×108个/克，然后加入浓缩乳质量3％的糊精、0.005％的维生素B12及2％的葡萄糖，在进风温度125～135℃，塔温70～75℃，排风温度70～75℃的条件下进行喷雾干燥，得到含高温型嗜酸乳杆菌的乳粉，最后按质量比将50-60％的乳粉，20-30％的植脂末，5-10％的麦芽糊精和5-10％的鳖甲、白扁豆、小蓟、三七、蒺藜、蛤蚧、莲子、韭菜籽、山药、小茴香、槐花、佩兰、桑叶、木贼、黄芪、酸枣仁、筚芨、菊苣或北沙参的单个煎煮液混合，压片成型，即可制得含嗜酸乳杆菌和中草药的复合型奶片。