PROCEDE DE CRIBLAGE D'AGENT MODULANT L'UBIQUITINATION DE LA PROTEINE IKBALPHA ET MOYENS DESTINES A LA MISE EN OEUVRE DUDIT PROCEDE

摘要

Procédé pour le criblage d'agents modulant l'ubiquitination de la protéine IκBα par un complexe protéique fonctionnel ubiquitine ligase comprenant la protéine β-TrCP, ledit procédé comprenant les étapes suivantes :(a) mettre en contact un agent candidat à tester avec des cellules de levure recombinantes qui expriment dans leur noyau :(i) une protéine de fusion comprenant le polypeptide IκBα et au moins une première protéine détectable ; et(ii) une protéine comprenant le polypeptide β-TrCP ;(b) quantifier ladite première protéine détectable dans les cellules de levure, à la fin d'au moins une période de temps prédéterminée après la mise en contact de l'agent candidat avec lesdites cellules ;(c) comparer la valeur obtenue à l'étape (b) avec une valeur témoin obtenue lorsque l'étape (a) est réalisée en l'absence de l'agent candidat.