| 主权项 |
1.一种海南鹤顶兰的早期胚无菌播种和组织培养方法，其特征在于包括4个步骤：(1)材料选择：将发育60-70天的果实取下做外植体；(2)无菌播种：用70％-80％的酒精浸泡20-40秒后置于8％-15％的次氯酸钠溶液中消毒15-25分钟，无菌水冲洗4-5次后切开果实，用接种针将近绿色的未成熟胚接种到培养基中，所述的培养基每升中含有6-苄基嘌呤2毫克，萘乙酸0.3毫克，椰子水150毫升，琼脂7克，蔗糖30克，其余的成分为MS；(3)组织培养，包括2个步骤：a.利用上述步骤生长的无菌实生苗或其原球茎在培养基上进行原球茎的增殖并分化出小苗，所述的培养基每升中含6-苄基嘌呤2毫克，萘乙酸0.3毫克，椰子水150毫升，2，4-二氯苯氧乙酸0.8毫克，琼脂7克，蔗糖30克，其余的成分为MS；b.把未分化出小苗的原球茎转移到培养基上出芽并形成完整植株，所述的培养基每升中含有萘乙酸0.8毫克，香蕉汁10克，琼脂7克，蔗糖30克，其余的成分为MS；(4)试管苗移栽：当试管苗能长至3-4厘米高时，转移到自然光下炼苗7-10天，再打开瓶塞炼苗2天，然后将其从玻璃瓶中取出，洗净根部的培养基，移栽入体积1∶1的泥炭和粗椰壳混合基质中；在上述所有步骤中所述的培养基pH 5.4-5.6，培养温度26℃±2℃，光照度1500～2000lx，光照12小时/天。 |
