PROCEDIMIENTO PARA AISLAR MACROMOLECULAS BIOLOGICAS Y DISPOSITIVO PARA PONER EN PRACTICA ESTE PROCEDIMIENTO.

摘要

Procedimiento para aislar macromoléculas biológicas, especialmente ADN de plásmidos, de material de partida biológico, en el que se forma un lisado por disgregación del material de partida, se purifica este lisado y se carga la solución así obtenida sobre un material cromatográfico (29) que adsorbe las macromoléculas, realizándose antes o al mismo tiempo una disminución de la concentración de endotoxinas, y en el que se eluyen las macromoléculas purificadas del material cromatográfico (29) con ayuda de un agente eluyente y, finalmente, se liberan dichas macromoléculas del agente eluyente, caracterizado por los pasos de procedimiento siguientes: (1) en un dispositivo (1, 41, 51) se colocan una primera placa de microvaloración (14) con varias primeras cavidades paralelas (16) y una segunda placa de microvaloración (23) con varias segundas cavidades (25) de tal manera que una primera y una segunda cavidades (16, 25) estén situadas siempre una tras otra; (2) en las primeras cavidades (16) se han dispuesto unidades de filtro (20); (3) en las segundas cavidades (25) se ha dispuesto el material cromatográfico (29); (4) en las primeras cavidades (16) se carga el lisado; (5) la solución que sale de las primeras cavidades (16) es transferida directamente a las segundas cavidades (25) y las macromoléculas son adsorbidas en el material cromatográfico (29); (6) las endotoxinas y otras impurezas son eliminadas por lavado con un agente de lavado; (7) en las segundas cavidades (25) se carga el agente eluyente, de modo que sale de la segunda placa de microvalo ración (23) una mezcla de agente eluyente y macromoléculas; (8) se transfiere la mezcla a una tercera placa de microvaloración (32) con varias terceras cavidades paralelas (34); (9) en las terceras cavidades (34) se han dispuesto unidades de ultrafiltración (35); (10) se someten las terceras cavidades (34) a una diferencia de presión y/o una fuerza centrífuga que ejercen fuerza en dirección a su lado de salida; (11) seguidamente, se obtienen las macromoléculas como retentado.