用于鉴定坛紫菜优良品系的分子标记及其应用

摘要

用于鉴定坛紫菜优良品系的分子标记及其应用，涉及一种SCAR标记技术及其应用。利用AFLP标记技术，对坛紫菜优良品系等进行分析，找到优良品系特异的AFLP标记，并将其转换成SCAR标记，用SCAR标记设计特异引物Marker1和Marker2，并将特异引物做成用于鉴定坛紫菜优良品系的检测试剂盒，通过特异引物PCR扩增对个体进行鉴定，从养殖对象或野生坛紫菜种质资源库中筛选出优良品系，缩短育苗周期，提高选育准确性。广泛用于品系纯度与品系鉴别和分子标记辅助育种。为种质鉴定奠定基础，为坛紫菜遗传多样性、基因定位和快速构建遗传图谱及分子标记辅助育种等研究提供参考数据。检测试剂盒使用方便，重复性好，可靠性高，检测费用低，省时省力。

主权项

1.用于鉴定坛紫菜优良品系的分子标记，其特征在于所述的特征序列扩增(SCAR)标记具有如下核苷酸序列：5’-AGTAAAATGGGGAACAGCGACTTCTACAGATGATTGCGAAGGTGTCGTAACAAAACAGCCTGATATGCGTCCAACTTTAGAGAATATTCAATATATTCTTCCCCAGTTCACTGGTCATGTTCAACAAACACCACCAATTTATTCTGCGATAC-3’获取SCAR标记的方法如下：利用AFLP分子标记技术，首先提取不同紫菜样品的叶状体总DNA，再通过总DNA的酶切、人工接头连接、预扩增以及选择性扩增，最后经聚丙烯凝胶电泳分析获得坛紫菜优良品系特有的AFLP标记的特异性条带；然后对特异性标记片段进行回收、回收产物PCR再扩增并克隆到T载体上，再通过测序分析、利用引物设计软件设计引物，最终将AFLP标记转化成SCAR标记，该标记表现共显性，由此获得与坛紫菜优良品系的优良性状相连锁的SCAR标记。