利用噬菌体展示技术展示抗原制备抗体的方法

摘要

本发明属于基因工程技术领域。利用噬菌体展示技术原理将外源抗原基因与丝状噬菌体III基因蛋白融合展示于噬菌体颗粒尾部，将抗原表位与丝状噬菌体VIII基因蛋白融合展示于丝状噬菌体颗粒表面。用展示有外源抗原及抗原表位的噬菌体颗粒为免疫原制备抗体。该技术拓宽了噬菌体展示技术的应用范围，同时也为抗体的制备提供了新途径。保护范围：1.一种用噬菌体展示技术展示抗原用以制备单克隆抗体及多克隆抗体的方法。2.一种用噬菌体展示技术展示人心肌肌钙蛋白抗原及其抗原表位用以制备cTnI单克隆抗体及多克隆抗体的方法。3.一种pIII型噬菌体展示载体pFD5。4一种噬菌体展示融合表达载体pFD5-cTnI。5一种pVIII型噬菌体展示融合表达载体PC89-cTnI_95～108。6.将展示有cTnI及cTnI_95～108的噬菌体颗粒作免疫原，免疫新西兰白兔获得cTnI抗体。

主权项

1.一种用噬菌体展示技术展示人心肌肌钙蛋白I抗原及其抗原表位的方法，其特征在于将人心肌肌钙蛋白I基因插入pIII型噬菌体展示载体多克隆位点，该载体具有LacZ启动子-Pelb引导序列-XcmI PCR产物克隆位点及多克隆位点-M13噬菌体包膜蛋白III基因部分序列；将人心肌肌钙蛋白I基因插入载体的多克隆位点，经IPTG诱导表达，在Pelb的引导下定位于细胞周质腔，用辅助噬菌体VCSM13超感染，利用噬菌体自我包装机制，将人心肌肌钙蛋白I展示于噬菌体颗粒尾部；同时，将人心肌肌钙蛋白I抗原表位即cTnI95-108基因插入pVIII型噬菌体展示载体多克隆位点，该载体具有LacZ启动子-多克隆位点-M13噬菌体包膜蛋白VIII基因部分序列，插入载体内的cTnI95-108经IPTG诱导表达，用辅助噬菌体VCSM13超感染，利用噬菌体自我包装机制，将cTnI95-108展示于噬菌体颗粒表面。