一种铁皮石斛种苗的制备方法

摘要

本发明是一种铁皮石斛种苗的制备方法。其特征在于按以下步骤进行：a).将植物铁皮石斛组织在研钵体中加少许液体培养基研磨后接种，进入旋转式摇床，培养温度25±1℃，黑暗条件下进行铁皮石斛细胞悬浮培养：b).将增殖的植物铁皮石斛细胞悬浮液倒入有滤纸的布氏漏斗，抽去培养液，再用蒸馏水洗涤若干次，对培养的铁皮石斛细胞进行细胞生长测定：c).选取铁皮石斛细胞生长进入静止期的细胞再接入铁皮石斛固体培养基进行丛芽增殖培养：d).选择生长良好的芽接入固体培养基进行生根培养，最后生产出铁皮石斛种苗。该方法解决了传统组织培养方法培养某些植物困难，尤其是一些药用植物、木本植物因其含有特殊代谢产物而导致培养困难、增殖率低的问题，同时无性系后代保持与母本优良特性的高度一致性，并大幅度提高增殖率，降低培养成本，实现了“细胞—组织”培养工厂化生产。

主权项

1.一种铁皮石斛种苗的制备方法，其特征在于按以下步骤进行：a).将植物铁皮石斛组织在研钵体中加少许液体培养基研磨后接种，进入旋转式摇床，培养温度25±1℃，黑暗条件下进行铁皮石斛细胞悬浮培养；b).将增殖的植物铁皮石斛细胞悬浮液倒入有滤纸的布氏漏斗，抽去培养液，再用蒸馏水洗涤若干次，对培养的铁皮石斛细胞进行细胞生长测定；c).选取铁皮石斛细胞生长进入静止期的细胞再接入铁皮石斛固体培养基进行丛芽增殖培养；d).选择生长良好的芽接入固体培养基进行生根培养，最后生产出铁皮石斛种苗；其中所述的植物铁皮石斛细胞悬浮液体培养基由MS+BA 0.3～0.6mg/L、NAA1-5mg/L、LH 0.5～1.5mg/L、蔗糖19～22g/L混合配制而成；所述的铁皮石斛固体培养基为MS基础培养基添加0.2-2mg/L的6BA和0.1-0.9mg/L的NAA制成。