发明名称 一种完整藻胆体的制备方法
摘要 一种完整藻胆体的制备方法,属于海洋生物技术领域。本发明以红藻和蓝藻为材料,应用超声波破碎细胞、去污剂从类囊体膜上解离藻胆体、常规离心去除去污剂、叶绿素和细胞碎片、聚乙二醇沉淀、最后经Sepharose CL-4B柱层析得到纯的完整藻胆体。本方法省去了传统的蔗糖密度剃度超速离心方法对设备要求高、操作复杂、并且很难进行大量制备的缺点,优良效果在于可以应用常规设备、对设备要求简单,容易大量制备并且大大降低了藻胆体的制备成本,从而为将藻胆体应用于超灵敏的生物医学检测奠定了基础,具有很好的应用前景和经济效益。
申请公布号 CN1654629A 申请公布日期 2005.08.17
申请号 CN200510042029.7 申请日期 2005.01.17
申请人 山东大学 发明人 张玉忠;张熙颖;陈秀兰;周百成
分类号 C12N1/12 主分类号 C12N1/12
代理机构 济南金海诺知识产权代理有限公司 代理人 于冠军
主权项 1、一种完整藻胆体的制备方法,步骤如下:(1)原料的破碎:以新鲜的蓝藻和红藻为原料,溶于pH=6.8~7.0的磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液中,采用超声波破碎细胞;(2)藻胆体解离:在破碎的藻体中加入去污剂吐温X-100,使藻胆体从类囊体膜上解离下来,离心,去除去污剂和破碎的细胞,得藻胆体的粗提物;(3)藻胆体的浓缩:用聚乙二醇沉淀藻胆体,收集沉淀;将沉淀重新溶解于pH=6.8~7.0磷酸氢二钠-磷酸二氢钾溶液中;(4)完整藻胆体的纯化:将上述藻胆体溶液过Sepharose CL-4B柱层析,收集洗脱前端的蓝紫色溶液,得到完整的藻胆体溶液。
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