信号序列捕获方法

摘要

一种编码缺乏分泌能力的人体mp1的DNA，它是通过去除稳态活性mp1的分泌信号和其胞外域主要部分制得的。该DNA与测试cDNA、编码已知分泌蛋白的cDNA和另一编码除去了分泌信号区域的相同蛋白的cDNA连接，所得每一种嵌合基因在细胞中表达以检查细胞增殖能力。在含作为测试cDNA的编码已知分泌蛋白的cDNA的细胞中检测到细胞增殖，然而对除去了分泌信号区域的编码相同蛋白的cDNA没有检测到细胞增殖。因此，通过构建cDNA文库并通过上面的方法筛选它，可以检测和分离编码包括I型膜蛋白和II型膜蛋白的分泌蛋白的cDNAs。

主权项

1.一种检测待测试的cDNA编码的肽是否具有分泌能力的方法，该方法包括：(a)将待测试cDNA与一种载体连接，所述载体含有(1)编码如下肽的DNA，所述肽选自缺失分泌信号区的mpl、GM-CSF受体的β链、EPO受体、c-kit受体、neu或FLT-3，和(2)位于该DNA的5’上游区的编码用于确定分泌能力的靶肽的cDNA克隆位点；(b)将(a)中制得的载体导入细胞中，和(c)培养(b)中制得的转化体，并检测细胞增殖能力。