筛选抗SARS冠状病毒药物用非感染性病毒重组基因SARS－CoV－EGFP

摘要

本发明涉及医药技术领域，是一种可用于筛选抗SARS冠状病毒药物及病毒学基础研究的非感染性病毒重组基因SARS-CoV-EGFP。本发明在SARS冠状病毒全基因组的5’端引入启动子序列T7 Pro，将S蛋白中与病毒致病性和毒力有关的外部结构域的编码序列用编码增强型绿色荧光蛋白的EGFP基因取代，全基因组的3’端依次引入HDV反义基因组核酶序列HDV R2、T7转录终止子序列T7 Ter，建成重组基因SARS-CoV-EGFP，将其插入载体构建成重组质粒pUC19/SARS-CoV-EGFP，转染细胞后，经复制、转录、翻译、加工、包装成的重组病毒能使被转染的细胞在荧光显微镜下发出绿色荧光。若在转染的同时加入抗病毒药物，就可根据荧光的有无、强弱，判断药物的作用效果，因而可用于筛选抗SARS冠状病毒的药物。

主权项

1.一种非感染性病毒重组基因SARS-CoV-EGFP，由SARS-CoV全基因组改造而成，其特征在于在SARS-CoV全基因组的5’端引入启动子序列T7 Pro，将S蛋白中第20-1195位氨基酸残基的编码序列用编码绿色荧光蛋白EGFP的基因取代，全基因组的3’端依次引入HDV反义基因组核酶序列HDV Rz、T7转录终止子序列T7 Ter，SARS-CoV-EGFP的核苷酸序列如核苷酸序列表1。