用于检测副溶血弧菌的耐热性溶血素相关溶血素基因的检测试剂

摘要

本发明涉及一种检测试剂，其用于在特异性扩增TRH1和TRH2 RNA的扩增程序中检测耐热性溶血素相关溶血素(TRH)基因，该试剂包括具有与来自TRH基因的RNA的特定序列互补的序列的第一引物，以及具有与所述特定序列同源的序列的第二引物。

主权项

1.一种用于检测样品中存在的副溶血弧菌耐热性溶血素相关溶血素(TRH)基因的检测试剂，该检测试剂被用于使用RNA扩增程序的检测方法中，所述RNA扩增程序包括以下步骤：以一段来自所述TRH基因的RNA的特定序列作为模板，通过RNA依赖性DNA聚合酶，应用具有与所述特定序列互补的序列的第一引物和具有与所述特定序列同源的序列的第二引物，生成cDNA，由此形成双链RNA-DNA，其中第一引物或第二引物在其5’末端添加了RNA聚合酶的启动子序列；通过核糖核酸酶H降解所述双链RNA-DNA中的RNA部分，从而生成单链DNA；和以所述的单链DNA作为模板，通过DNA依赖性DNA聚合酶，合成具有所述启动子序列的双链DNA，其中所述双链DNA能转录为由所述特定RNA序列或者所述特定RNA序列的互补序列组成的RNA；其中，该双链DNA在RNA聚合酶的作用下生成RNA转录产物，所述RNA转录产物作为模板用于随后通过RNA依赖性DNA聚合酶合成cDNA；所述的试剂包括，第一引物，其是由SEQ.ID No.2所示序列的至少10个连续碱基组成的寡核苷酸，或者是从SEQ.ID No.2所示序列的至少10个连续碱基组成的寡核苷酸中缺失、替换或添加一个或多个核苷酸后能特异性结合到所述特定序列上的寡核苷酸；和第二引物，其是由SEQ.ID No.1所示序列的至少10个连续碱基组成的寡核苷酸，或者是从SEQ.ID No.1所示序列的至少10个连续碱基组成的寡核苷酸中缺失、替换或添加一个或多个核苷酸后能特异性结合到所述特定序列的互补序列上的寡核苷酸。