文心兰优质种苗快速繁殖方法

摘要

本发明涉及文心兰的优质种苗快速繁殖方法和所使用的培养基。文心兰又名舞女兰、金蝶兰、瘤瓣兰等，是兰科植物中最大的属之一，文心兰由于花色艳丽、花朵数量多，花形变化大，有些品种还具有清香，既可做盆花栽培，也可做切花观赏，是世界上栽培最广泛、最普及的兰花种类之一。我国大陆近年来引进了不少文心兰品种，但种苗生产主要靠分株，繁殖速度慢，母本的病害也易感染给种苗。本发明提供了多种文心兰原种和杂种的组织培养繁殖方法和所使用的独特培养基。生产出的文心兰种苗具有遗传稳定性高，出苗快，苗壮，种苗品质好、抗性强、生长良好等优势。已生产出优质的文心兰种苗，市场十分看好。

主权项

1、一种文心兰优质种苗快速繁殖方法，采用种质优良的文心兰，利用文心兰的花梗和茎尖为外植体，采用独特的培养基进行丛生芽增殖，其特征在于该方法包括如下步骤：1)、取材：优良文心兰种质；2)、外植体的消毒：取同色文心兰花芽的花梗和茎尖，用自来水冲洗干净后，剪取2厘米带节的花梗切段或新长出的2厘米的幼芽，在超净工作台上用70％的酒精浸泡1分钟，再用0.1％升汞溶液灭菌10分钟，无菌水冲洗5次后，用无菌吸水纸吸干，花梗切段两端各剪去0.5厘米，幼芽基部切去0.3厘米接种到原球茎和丛生芽诱导培养基上；3)、花梗丛生芽的诱导：花梗苗的诱导培养基为N6+6-苄基嘌呤3-5毫克/升+萘乙酸0.2-0.5毫克/升+15％椰子水培养基上，在培养温度26±2℃条件下，15天花芽开始生长，已发育完成的花蕾会继续在试管内开花，腋芽中未发育完全的花芽能转化成营养芽，形成带叶的花梗苗，培养基含蔗糖30克/升，pH5.5-5.8，琼脂0.7％；4)、茎尖丛生芽的诱导：采用茎尖为外植体时，诱导培养基为N6+6-苄基嘌呤2-3毫克/升+萘乙酸0.2-0.5毫克/升+15％椰子水，在培养温度26±2℃条件下，10天芽启动生长，40天能长成3-4厘米高；5)、丛生芽增殖：将利用花梗和茎尖培养得到的小苗，剪去部分叶片转移到丛生芽增殖培养基：N6+6-苄基嘌呤1-5毫克/升+萘乙酸0.2-0.5毫克/升+15％椰子水+蔗糖30克/升，能诱导原球茎和丛生芽形成，当6-苄基嘌呤浓度为1-2毫克/升时只有丛生芽，无原球茎，当6-苄基嘌呤浓度为3-4毫克/升时既有丛生芽，又有原球茎，当6-苄基嘌呤浓度为5毫克/升以上时，生成的原球茎多，诱导出的丛生芽数量少，原球茎能在较高的6-苄基嘌呤浓度培养基上增殖，原球茎转入较低6-苄基嘌呤浓度的培养基时会分化出丛生芽，丛生芽在较低6-苄基嘌呤浓度的培养基上能增殖；6)、生根壮苗培养：丛生芽增殖多代后，可将丛生芽切割成单个芽，接种在1/2 N6 培养基+蔗糖15克/升+香蕉汁100克/升+活性碳0.5克/升的生根壮苗培养基上进行生根壮苗培养；40天能形成株高3-4厘米的完整植株；7)、试管苗移栽：试管苗移栽时，在自然光照下炼苗7-14天，将文心兰小苗从玻璃瓶中取出，洗净根部的培养基，在0.1％的高锰酸钾溶液中浸泡5分钟后凉干，以小塑料盆为栽培容器，以浸泡过的小树皮和蛭石为栽培基质，保持适当通风和足够的湿度。