摘要 |
<p>Verfahren zur Detektion und quantitativen und/oder qualitativen Analyse von Protein-Protein-Interaktionen, dadurch gekennzeichnet, dass die proteolytische Freisetzung des mindestens einen Proteins durch a) die Expression eines ersten Fusionsproteins, umfassend einen ersten Interaktionspartner und ein Proteasefragment, und b) die Expression eines zweiten Fusionsproteins, umfassend einen zweiten Interaktionspartner und ein zweites Proteasefragment, und c) die Transkomplementation einer funktionalen Protease durch die Interaktion des ersten und des zweiten Interaktionspartners miteinander, und d) die Expression eines dritten Fusionsproteins, umfassend ein freizusetzendes Protein und eine Domäne, die zur Verankerung des Fusionsproteins ausserhalb des Zellkerns führt, und e) die proteolytische Abspaltung des freizusetzenden Proteins durch die Komplementierte Protease erfolgt, wobei gegebenenfalls mindestens eines der beiden ersten Fusionsproteine eine weitere Domäne besitzt, die zur Verankerung des Fusionsproteins ausserhalb des Zellkerns führt.</p> |