冻干水痘减毒活疫苗的生产方法及产品

摘要

本发明提供一种冻干水痘减毒活疫苗的生产方法及产品，以水痘减毒株OKa株为毒株，应用转瓶生产工艺，以人二倍体细胞2BS为培养基质生产的冻干水痘减毒活疫苗。应用旋转培养技术，不但疫苗病毒滴度稳定，而且疫苗的单瓶产量较静止培养显著提高了，降低了生产成本，能使更多的易感人群应用水痘疫苗，从而使该病的发病率降至最低点，采用转瓶生产工艺生产的水痘疫苗各项指标均符合《WHO水痘活疫苗规程》及《冻干水痘减毒活疫苗制造及检定规程》的要求。解决了静止培养工艺中产量低，生产占地大，牛血清蛋白残存量偏高及劳动强度大等弊端。

主权项

1、一种冻干水痘减毒活疫苗的生产方法，以水痘减毒株OKa株为毒株，以人二倍体细胞2BS为培养基质生产的冻干水痘减毒活疫苗，包括以下主要步骤：取人胚肺二倍体细胞2BS按1∶2-1∶4的比例扩增传代；其中细胞扩增所用培养基是添加10-15％小牛血清的MEM，pH7.2-7.6；将细胞培养瓶置37℃下，以15-30转/小时旋转培养3-5天，形成均匀、致密的细胞单层，然后弃去生长液；在培养瓶内按毒种与细胞1∶60～120比例加入毒种，对细胞进行感染，并于35-36℃转速15-30转/小时旋转培养，培养时间为2-4天；当2BS细胞上出现75％以上典型病变时，倒去原维持液，用原维持液量二倍以上的Earle’s液冲洗细胞表面，洗去牛血清，加入含有疫苗稳定剂的疫苗液收获；将收获的疫苗液经-70℃冻融，20KHZ超声破碎细胞，低温下离心去除细胞碎片，经滤过澄清，上清液合并后即为半成品疫苗；检定合格的半成品疫苗，置冰水浴中保冷分装，采用适宜的冻干曲线进行冻干，制备出冻干剂型的水痘减毒活疫苗。