夹心免疫传感法检测小分子蛋白质及肽类的方法

摘要

本发明的夹心免疫传感法检测小分子蛋白质及肽类的方法属免疫检测领域，特别涉及一种定量检测分子量在20kDa以下蛋白质及肽类的方法。是以镀有金膜的载玻片或三棱镜为检测基片，经组装体形成、第一抗体-抗原二元免疫复合物的形成、第一抗体-抗原-第二抗体夹心三元免疫复合物的形成、共振波长检测等过程完成的。待测抗原是胰岛素、bFGF、T₃或T₄等；相应的第一抗体和第二抗体应为特异性抗每种待测抗原的单克隆第一抗体和第二抗体，且它们具有互补性。本发明可实时监测生物分子的动态反应过程，能简易直接检测待测物浓度的变化；灵敏度高，无背景干扰；试剂成本低。第二抗体的结合产生了更强的光学信号，发挥了生物学放大作用。

主权项

1、一种夹心免疫传感法检测小分子蛋白质及肽类的方法，在检测基片上，经组装体形成、第一抗体-抗原二元免疫复合物的形成、第一抗体-抗原-第二抗体夹心三元免疫复合物的形成、共振波长检测过程完成的；所说的组装体形成是将抗待测小分子蛋白或肽类的单克隆抗体作为第一抗体固定在传感膜上；所说的第一抗体-抗原二元免疫复合物的形成是指加入待测样品后，检测基片上的第一抗体与待测样品中的待测抗原形成第一抗体-抗原二元免疫复合物；所说的第一抗体-抗原-第二抗体夹心三元免疫复合物的形成是指向样品池中加入另一株与第一抗体互补的抗待测的小分子蛋白或肽类单克隆抗体作为第二抗体时，检测基片上的第一抗体-抗原二元免疫复合物通过抗原与第二抗体特异性结合形成第一抗体-抗原-第二抗体三元免疫复合物；其特征在于，所说的检测基片是镀有金膜作传感膜的载玻片或三棱镜；所说的待测抗原是分子量低于20kDa的小分子蛋白质或肽类；所说的共振波长检测是根据第二抗体引起的共振波长的变化，与标准曲线对比，计算被测样品中的待测小分子蛋白或肽类含量。