| 主权项 |
1.一种65kd至100kd之重组型人类透明带蛋白质3(hZP3), 其可以在低于1g/ml之浓度下结合人类精虫,并于 结合一小时内引发顶体反应,其中该hZP3包含有一 包含下述胺基酸序列之糖多: 2.如申请专利范围第1项之重组型人类透明带蛋白 质3(hZP3),其中该糖多系由人类卵巢细胞株所制 造。 3.一种用于制造申请专利范围第1项之重组型人类 透明带蛋白质3(hZP3)的方法,其包含下列步骤: (a)将一编码有如申请专利范围第1项之重组型人类 透明带蛋白质3(hZP3)之聚核酸转导至一来自一人 类卵巢细胞株的细胞中; (b)建立一经稳定转染之细胞培养物以制造该糖多 ;及 (c)从该细胞培养物分离出该糖多。 4.如申请专利范围第3项之方法,其中该卵巢细胞株 为PA-1。 5.如申请专利范围第3项之方法,其中该聚核酸编 码一含有一人类透明带蛋白质3(hZP3)序列之多。 6.如申请专利范围第1项之重组型人类透明带蛋白 质3(hZP3),其中该糖多具有41个到300个之间的胺基 酸。 7.如申请专利范围第1项之重组型人类透明带蛋白 质3(hZP3),其中该糖多具有41个到200个之间的胺基 酸。 8.如申请专利范围第1项之重组型人类透明带蛋白 质3(hZP3),其中该糖多具有41个到100个之间的胺基 酸。 9.如申请专利范围第1项之重组型人类透明带蛋白 质3(hZP3),其中该糖多具有41个到65个之间的胺基 酸。 10.一种于体外从人类精虫样品检测男性不育症的 方法,其包含下面步骤: (a)令申请专利范围第1项的重组型人类透明带蛋白 质3(hZP3)与该样品中的精虫混合以形成一混合物; (b)检测该混合物中精虫的生物活性;及 (c)以一参考値来比较该生物活性。 11.如申请专利范围第10项之方法,其中步骤(b)更包 含添加Pisum Satvum凝集素于该混合物中。 12.如申请专利范围第10项之方法,其中该重组型人 类透明带蛋白质3(hZP3)被固着于一个固体相上。 13.如申请专利范围第10项之方法,其中该重组型人 类透明带蛋白质3(hZP3)是由人类卵巢细胞株之表现 而被制备者。 14.如申请专利范围第13项之方法,其中该人类卵巢 细胞株为PA-1。 15.一种由一核酸载体所转形的人类卵巢细胞,该核 酸载体可用于制造申请专利范围第1项的重组型人 类透明带蛋白质3(hZP3)。 16.一种65kd至100kd之重组型人类透明带蛋白质3(hZP3) ,其可以在低于1g/ml之浓度下结合人类精虫,并于 结合一小时内引发顶体反应,其包含有一包含下述 胺基酸序列之糖多: 或是其守恒性取代的胺基酸序列,该等保留地取代 系位于胺基酸位置数310、315、320、323、324、326、 328、329、330、332、334、335、337、339、340、341、342 、345及346之至少一者,其中该糖多以结合强度至 少10倍于老鼠ZP3莫耳当量的强度结合至人类精子 。 17.一种65kd至100kd之重组型人类透明带蛋白质3(hZP3) ,其可以在低于1g/ml之浓度下结合人类精虫,并于 结合一小时内引发顶体反应,其包含有一包含下述 胺基酸序列之糖多: Ser-Trp-A-Pro-Val-Glu-Gly-Pro-Ala-Asp-Ile-Cys-B-Cys-Cys-C-Lys- Gly-D-Cys-E-F-Pro-Ser-G-Ser-H-I-Gln-J-His-K-Met-L-M-Trp-Ser-N- Ser-Ala-Ser,其中 A系选自Phe及Tyr所构成的群组; B系选自Gln及Asp所构成的群组; C系选自Asn及Gln所构成的群组; D系选自Asp、Asn、Glu、Gln、Ile、Pro、Phe及Cys所构成 的群组; E系选自Gly、Ala及Ile所构成的群组; F系选自Thr及Ser所构成的群组; G系选自His及Lys所构成的群组; H系选自Arg及Lys所构成的群组; I系选自Arg及Lys所构成的群组; J系选自Pro及Met所构成的群组; K系选自Val、Iso及Met所构成的群组; L系选自Ser及Thr所构成的群组; M系选自Gln及Asn所构成的群组;以及 N系选自Arg及Lys所构成的群组。 18.一种65kd至100kd之糖基化的重组型人类透明带蛋 白质3(hZP3),其可以在低于Ig/ml之浓度下结合人类 精虫,并于结合一小时内引发顶体反应,其包含有 如下所述之胺基酸序列: 其系以人类卵巢细胞表现,具有精子结合以及顶体 反应诱发活性。 19.如申请专利范围第18项之蛋白质,其中该卵巢细 胞系择自由下列所构成的群组:PA-1、EB2、CaoV-3、 CaoV-4、OVCAR-3、SKOV-3以及SW626。 20.如申请专利范围第18项之蛋白质,其中该卵巢细 胞系PA-1。 图式简单说明: 第1图为人类ZP3之308至348残基的胺基酸序列。 第2图为人类ZP3之308-348胺基酸区域的O-糖基化位置 代表性的预测摘要。 第3图为老鼠ZP3之308-348胺基酸区域O-糖基化位置代 表性的预测摘要。 |
