一种构建T载体的方法

摘要

本发明公开了一种制备T载体的方法，其目的是提供一种制备具有较高TA克隆效率的T载体。本发明的制备T载体的方法，包括以下步骤：1)制备含有XcmI盒或AhdI盒的前T载体；所述XcmI盒包括间隔DNA序列、紧密连接于所述间隔DNA序列两侧的各一个XcmI酶切位点序列，所述AhdI盒包括所述间隔DNA序列、紧密连接于所述间隔DNA序列两侧的各一个AhdI酶切位点序列；2)用XcmI或XcmI的同裂酶，或AhdI或AhdI的同裂酶酶切步骤1)中的前T载体，得到T载体；其中，所述步骤1)中的间隔DNA序列为ccdB基因序列。本发明的制备T载体的方法将在基因工程领域中发挥重要作用。

主权项

1、一种制备T载体的方法，包括以下步骤：1)制备含有XcmI盒或AhdI盒的前T载体；所述XcmI盒包括间隔DNA序列、紧密连接于所述间隔DNA序列两侧的各一个XcmI酶切位点序列，所述AhdI盒包括所述间隔DNA序列、紧密连接于所述间隔DNA序列两侧的各一个AhdI酶切位点序列；2)用XcmI或XcmI的同裂酶，或AhdI或AhdI的同裂酶酶切步骤1)中的前T载体，得到T载体；其特征在于：所述步骤1)中的间隔DNA序列为ccdB基因序列。