活疫苗及生产方法

摘要

本发明涉及一种从不同来源分离病毒以及在无血清Vero细胞培养物中生产活减毒流感疫苗的简单有效的方法，其中所述生产在最小化或预防所述病毒的表面蛋白由于适应性选择而发生变化的条件下进行。本方法不要求对从所述细胞培养物收获的含病毒的上清液进行纯化，也不要求对所述病毒进行温育后处理以进行HA活化。本发明还涉及A型和B型流感原株候选物以及由其制造的疫苗。

主权项

1.一种生产完整病毒疫苗的方法，所述完整病毒疫苗最好是一种减毒活疫苗，所述方法包括下面步骤：a)用一种所需病毒感染非洲绿猴肾(Vero)细胞，其中所述Vero细胞已经在无血清培养基中培养并从中分离，所述无血清培养基也不含非血清蛋白；b)将所述感染细胞与一种合适的无血清细胞培养基混合，所述无血清细胞培养基除蛋白酶和核酸酶外也不含非血清蛋白；然后c)在所述蛋白酶和所述核酸酶的存在下温育所述细胞，使得生产传染性病毒并同时消化释放到细胞培养基中的核酸；d)通过收集离心所述细胞培养物获得的包含病毒的上清液，收获传染性病毒；然后e)如下制备其疫苗：用选自以下的至少一种加工步骤处理所述包含病毒的上清液：过滤、浓缩、冰冻、冻干和加入稳定剂使之稳定。