转基因产品的低密度基因芯片检测方法

摘要

转基因产品的低密度基因芯片检测方法，涉及一种采用低密度基因芯片用于转基因产品的检测方法。其步骤为：选择引物与探针；处理芯片载体；制备芯片：将探针溶于超纯水，加入点样液，将探针固定在已处理的芯片载体上，点样；多基因PCR扩增；MPCR产物标记；MPCR产物的芯片杂交试验；扫描分析和数据处理：将杂交反应后的芯片插入扫描仪的检测孔内，进行结果扫描和分析处理。与传统的检测方法相比，具有快速高效，自动化程度高等特点。可同时对转基因产品中常用的启动子、终止子、筛选标记基因、抗除草剂基因、抗虫基因等9个外源DNA序列进行检测分析。

主权项

1、转基因产品的低密度基因芯片检测方法，其特征在于其步骤为：1)选择引物与探针；2)处理芯片载体：选择芯片载体，经清洗、干燥，再硅烷化，将硅烷化的芯片载体用1，4-苯二异硫氰酸盐溶液中浸泡，晾干；3)制备芯片：将探针溶于超纯水，加入点样液，将探针固定在已处理的芯片载体上，点样，放置，清洗，晾干，干燥，备用；4)多基因PCR扩增：加入二甲基亚砜将单功能荧光染料Cy3干粉重悬，将重新悬浮的染料分装到小管中，以DNA浓缩系统将其抽干，干燥，进行多基因PCR反应；5)MPCR产物标记：取多基因PCR产物变性，进行荧光标记扩增，向反应管中加入缓冲液，变性PCR产物，每管加入无水乙醇沉淀核酸，离心，洗涤，用NaHCO3溶解，将NaHCO3溶解的多基因PCR产物加入到分装的Cy3染料小管中，将染料干粉重悬，放置，孵育，使用PCR纯化试剂盒，纯化、冻干浓缩至所需体积；6)MPCR产物的芯片杂交试验：每个反应管加入乙二胺四乙酸溶液，再加入纯化的标记PCR产物，变性，取出放置于冰上，加入杂交液，制成杂交混合液，将制备的芯片滴加杂交混合液，置杂交炉中杂交过夜，杂交后的芯片经洗涤，离心，晾干；7)扫描分析和数据处理：将杂交反应后的芯片插入扫描仪的检测孔内，进行结果扫描和分析处理。