豆薯抗肿瘤蛋白

摘要

豆薯抗肿瘤蛋白，本发明涉及一种具有抑制肿瘤的活性的新型蛋白的制备和应用。从豆薯种子中经过特定的方法纯化分离出一种新的豆薯抗肿瘤蛋白。本发明提供的豆薯抗肿瘤蛋白具有抑制肝癌、胃癌和黑色素瘤的活性。

主权项

1、豆薯抗肿瘤蛋白，其特征在于：该蛋白是一种等电点小于pH6的酸性蛋白质，分子量为15.5kDa；该蛋白由以下7个步骤分离得到的：(1)豆薯种子经粉碎后，加生理盐水抽提、匀浆两次，置4℃过夜；(2)用盐酸或醋酸调pH5，静置多于2小时，低温超速离心得上清液；(3)进一步加固体硫酸铵分级沉淀，低温超速离心得30％-95％饱和度的硫酸铵沉淀；(4)上述硫酸铵沉淀对蒸馏水或对5mMol/L磷酸盐缓冲液或对5mMol/L醋酸盐缓冲液透析超过24小时，低温超速离心得黄色上清液；(5)上述上清液上样于CM-52纤维素柱，该纤维素柱用5mMol/L，pH6.5的磷酸盐或醋酸盐缓冲液平衡，收集流出液；(6)上述流出液上样于DEAE-52纤维素柱，该纤维素柱用10mMol/L，pH7.4的Tris-HCl缓冲液平衡，上样完后，用同一缓冲液洗柱，使280nM检测达基线后，用含0-0.5Mol/L NaCl的同一缓冲液作梯度洗脱，收集第1峰，合并该峰组分；(7)上述组分对蒸馏水充分透析后，冷冻干燥得冻干粉，就是豆薯抗肿瘤蛋白。