PROCEDIMIENTO PARA LA PREPARACION DE UN FRAGMENTO DE ADN QUE CODIFICA UN POLIPEPTIDO DE CEREBRO HUMANO Y POSEE ACTIVIDAD NATRIURETICA; PROCEDIMIENTO DE PREPARACION DEL POLIPEPTIDO; FRAGMENTO DE ADN; POLIPEPTIDO.

摘要

UN PROCEDIMIENTO PARA LA PREPARACION DE UN FRAGMENTO DE ADN QUE CODIFICA UN POLIPEPTIDO DERIVADO DE CEREBRO HUMANO Y POSEE ACTIVIDAD NATRIURETICA Y QUE TIENEN LA SIGUIENTE SECUENCIA DE AMINOACIDOS. SER PRO LYS MET VAL GLN GLY SER GLY CCYS PHE GLY ARG LYS MET ASP ARG LLE SER SER SER SER GLY LEU GLY CYS LYS VAL LEUY ARG ARG HIS, PROCEDIMIENTO QUE COMPRENDE AISLAR LAS SIGUIENTES ETAPAS (a)CONSTRUIR UN BANCO DE ADNc POR MEDIO DE LAS SIGUIENTES OPERACIONES (1) AISLAR ARNm DE CEREBRO HUMANO O AURICULA HUMANA POR MEDIO DE HOMOGENIZACION DEL MISMO, AISLAMIENTO POR ULTRACENTRIFUGACION Y PURIFICACION (2)SINTETIZAZ EL ADNc A PARTIR DEL ARNm ASI OBTENIDO (3)APLICAR UNA ENDONUCLEASA ADAPTADORA DEL EcoRI AL ADNc ASI OBTENIDO Y DESPUES FOSFOROLAR EL EXTREMO (4) LIGAR UTILIZANDO UN VECTOR CON LO QUE EL BANCO QUEDA CONSTRUIDO RASTREAR EL CLON DE PNC HUMANO UTILIZANDO UN FRAGMENTO DE ADNc PORCINO MARCADO COMO SONDA O HIBRIDAR AMBOS PARA SELECCIONAR EL CLON POSITIVO (C) A PARTIR DE UN CLON POSITIVO SELECCIONADO CON UNA ENDONUCLEASA ADECUADA PARA OBTENER EL FRAGMENTO DE ADN DESEADO.