大蒜病毒检测试剂盒及其检测方法

摘要

本发明涉及大蒜病毒RT－PCR检测试剂盒及其检测方法，专用于大蒜花叶病毒(GMV)、大蒜潜隐病毒(GCLV)的检测。试剂盒包括：反转录试剂盒，PCR试剂盒及阳性对照三部分。检测方法，包括反转录反应，PCR反应及电泳检测，含有GMV病毒大蒜样品的电泳检测结果为扩增出327bp的电泳条带，含有GCLV病毒大蒜样品的电泳检测结果为扩增出469bp的电泳条带。本试剂盒PCR部分采用小反应体系，节约药品，降低成本，使用方便。通过特异性和灵敏度鉴定，证明本试剂盒特异性和灵敏度较高。

主权项

1、一种大蒜病毒RT-PCR检测试剂盒，包括：反转录试剂盒，PCR试剂盒及阳性对照三部份：1)反转录试剂盒，含有PCR试剂管1和无RNA酶的水，其中PCR试剂管1内含10×buffer，dNTP，MgCl2，RNA酶抑制因子，oligo-dT引物，反转录酶；2)PCR试剂盒，含有PCR试剂管2、试剂A及试剂B，其中PCR试剂管2内含10×PCR buffer，MgCl2，dNTP，Taq酶，试剂A内含引物GMVP1：5’-TGGAAGGCAAAGTTACAGGAGG-3’引物GMVP2：5’-GTCAAATGCGTACCGTGCGAGA-3’试剂B内含引物GCLVP1：5’-AGTTGCGACTGCTGAAGACC-3’，引物GCLVP2：5’-GCCATTACGCCTATTCCTAC-3’3)阳性对照，为从大蒜病叶中提取的，含有GMV、GCLV两种病毒RNA的RNA。