一种新型含碘树脂衍生物用在基于质谱的蛋白组学研究中的方法

摘要

本发明涉及一类含碘及同位素标记的树脂衍生物在基于质谱的蛋白组学研究中的应用。本发明所述的试剂的结构为：Solid－Link－R¹ (H/D)－COCH₂I其中，Solid部分是带有氨基作为反应基团的树脂；Link部分是可用于固相合成的连接部分；R¹ (H/D)部分是含8－10个氢/氘取代的链状或支链状的氨基酸。本发明提供了将此试剂应用在半胱氨酸、含半胱氨酸的肽、蛋白质定性定量研究中的方法，此方法包括下列步骤：1)样品与对照品的处理；2)样品、对照品分别与氢代或氘代的试剂反应；3)反应猝灭；4)抽滤，洗涤之后，固体部分置于三氟乙酸溶液中回收待分析的部分；5)浓缩，萃取或沉淀后，将待分析部分溶于缓冲溶液，μLC－MS分析。6)图谱解析，进行定性定量分析。

主权项

1.一种用在半胱氨酸、含半胱氨酸的肽的定性与相对定量的测定方法，此方法包括下列步骤：a)目标分析物经还原；b)目标分析物与试剂反应；c)反应猝灭；d)洗涤之后，进行标记片段回收待分析部分；e)浓缩提纯后，将待分析部分溶于缓冲溶液，μLC-MS分析；其特征是所述的目标分析物是半胱氨酸，含半胱氨酸的肽，所述与目标分析物反应的试剂是含碘树脂试剂，它具有如下结构：Solid-Link-R’(H/D)-COCH2I，其中，Solid为固相部分，该部分是带有甲氨基作为反应基团的树脂；Link为连接部分，该部分是可用于固相合成的连接部分；R’(H/D)为标记部分，该部分是含8-12个氢/氘取代的链状或支链状的氨基酸；活性基团部分是碘乙酰基。