稳定高产黄酮的雪莲细胞系TUIP－8的大规模高密度培养方法

摘要

本发明建立了大规模高密度培养雪莲细胞的工艺与方法。通过优化雪莲细胞的培养参数，优化培养基的组成，以及改装生物反应器使之适应雪莲细胞生长，实现植物细胞的高密度培养。在7.5L生物反应器培养雪莲细胞，培养密度一般为21g/L工作体积，黄酮含量大于11％。用本发明生产雪莲中主要的药用成分雪莲黄酮，成本小，产量大，不受气候和地理条件限制，可以放大生产规模以满足临床用药需求。从雪莲细胞培养物中提取有效药用成分可取代天然雪莲的采挖，有利于保护国家珍惜药用植物资源。

主权项

1、大规模高密度培养雪莲细胞的方法，其特征在于该方法为摇瓶悬浮培养：在300mL三角瓶中，加入90mL改进的MS培养基，即在MS培养基中添加0.2～0.4mg/L苄基腺嘌呤(BA)、1～4mg/L奈乙酸(NAA)及40～50g/L蔗糖，接种种龄为7d左右的细胞，细胞接种密度为4～8g(干重)/L，摇床转速为130～160r/min，光照强度为50～100μmol/(m2·s)的荧光灯照射，培养温度为18℃～28℃，pH值为5.8，培养时间为7～9d，获得细胞聚集尺寸5mm～20mm的雪莲细胞。