摘要 |
Un método para la preparación de un mutante infeccioso del IBDV capaz de replicarse en un cultivo de células CEF que comprende las etapas de: (i) preparar separadamente una construcción de ADN que contiene ADNc de los segmentos A y B genómicos de un IBDV que no es capaz de replicarse en un cultivo de células CEF, (ii) introducir una mutación en: a uno o ambos codones para los residuos de aminoácido 253 y 284 del gen de VP2 de las cepas Variante-E o Clásica del IBDV, o en b el codón para el residuo de aminoácido 284 del gen de VP2 de una cepa GLS del IBDV, en el ADNc que comprende el segmento A, de tal manera que los codones para los residuos de aminoácido 253 y 284 del gen de VP2 mutado codifiquen un residuo de histidina y un residuo de treonina, respectivamente, en el caso de las cepas Variante-E o Clásica del IBDV, o de tal manera que el codón para el residuo de aminoácido 284 del gen de VP2 mutado codifique un residuo de treonina en el caso de una cepa GLS del IBDV, (iii) permitir quelos transcritos de ARN del ADNc que comprende el segmento A y el segmento B inicien la replicación del mutante de IBDV en células huésped en un medio de cultivo, y (iv) aislar el mutante del IBDV del cultivo.
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