用作畜禽疫苗佐剂的CpG DNA基因工程重组体

摘要

本发明公开了一种能促进畜禽疫苗效价的用作畜禽疫苗佐剂的CpG DNA的基因工程重组体，该基因工程重组体是根据由序列为：5’－GGTGCATCGATGCAGGGGGG－3’、5’－GGTGCGTCGATGCAGGGGGG－3’及5－TCGTCGTTTTGTCGTTTTGTCGTT－3’串联而成的D19D282006目的片段DNA的序列，合成其寡核苷酸正链和负链合成其寡核苷酸正链和负链，在合成的寡核苷酸末端加上能与线形载体末端相匹配的碱基序列，然后将此寡核苷酸片段、退火缓冲液、及无菌重蒸水混合后，于90℃～100℃水浴中孵浴3分钟以上，自然冷却至室温，形成含D19D282006序列的DNA片段，此后将此DNA片段插入线性载体的相应的酶切位点，最后，将其转化感受态大肠杆菌而得到的基因工程重组体。本发明能提高CpG佐剂的效能，生产工艺简单，成本低廉，适合于大规模工业化生产。极大地降低了CpG ODN的生产成本。

主权项

1、一种能促进畜禽疫苗效价的用作畜禽疫苗佐剂的CpGDNA的基因工程重组体，其特征在于：该基因工程重组体是根据由序列为：5’----GGTGCATCGATGCAGGGGGG---3’、5’----GGTGCGTCGATGCAGGGGGG---3’及5’---TCGTCGTTTTGTCGTTTTGTCGTT---3’串联而成的D19D282006目的片段DNA的序列，合成其寡核苷酸正链和负链，在合成的寡核苷酸末端加上能与线形载体末端相匹配的碱基序列，然后将此寡核苷酸片段、退火缓冲液、及无菌重蒸水混合后，于90℃～100℃水浴中孵浴3分钟以上，自然冷却至室温，形成含D19D282006序列的DNA片段，此后将此DNA片段插入线性载体的相应的酶切位点，最后，将其转化感受态大肠杆菌而得到的基因工程重组体。