石斑鱼病毒性神经坏死病毒基因诊断试剂盒及检测方法

摘要

本发明提供一种石斑鱼病毒性神经坏死病毒(VNNV，Viral Nervous Necrosis Virus)的基因诊断试剂盒及检测方法。该试剂盒及检测方法是以根据病毒性神经坏死病毒保守区序列设计的两对引物为主体而设计的。本发明采用聚合酶链式反应(PCR)技术，对病毒性神经坏死病毒的特异性DNA核酸片段进行定性检测，简便快速，特异性好，灵敏度高；可用于石斑鱼各时期养殖过程中的病毒跟踪检测，也可用于环境监测，避免病毒传播流行，提高科学管理效率，具有很高的实用价值。

主权项

1.一种石斑鱼病毒性神经坏死病毒的基因诊断试剂盒，其特征是该试剂盒包括下列部件： 1).RNA提取液A液，2管，内装Trizol液； 2).B液，1管，内装氯仿； 3).C液，1管，内装异戊醇； 4).D液，1管，内装70％乙醇； 5).E液，1管，内装DEPC水； 6).RT反应液F液，1管，内装RT反应液，包括5×Buffer、dNTP、DEPC-H₂O、随机引物、RNA酶 抑制剂RNasinRI、反转录酶M-MLVRT； 7).RT-PCR反应液G液，1管，内装RT-PCR反应液，包括含Mg²⁺的10×Buffer、dNTP、正向引物 F1、反向引物R1、ddH₂O和TaqE；F1为：5′-CGTGTCAGTCATGTGTCGCT，R1为：5’ —CGAGTCAACACGGGTGAAGA； 8).阳性对照H液，1管，内装病毒性神经坏死病毒阳性模板； 9).盒子； 10).一块泡沫板，其大小与上述盒子的底面相同，装于盒子中；泡沫板上有不少于上述小管数量的小 孔，上述各小管分别对应放置于这些小孔中。