抗坏血酸的定量方法及定量用试剂

摘要

抗坏血酸的定量方法、定量用试剂和定量用试剂盒，是在水溶性介质中，在同一反应体系中进行在抗坏血酸氧化酶存在下进行氧化还原型抗坏血酸生成氧化型抗坏血酸和过氧化氢的反应和在过氧化物酶存在下使生成的过氧化氢和如通式(I)或通式(II)(其中各取代基的定义见说明书)表示的色源体反应而生成色素的反应，通过定量生成的色素定量试样中的抗坏血酸。在此方法基础上可以进行总抗坏血酸的定量。本发明方法提供一种也可应用于临床检查的筛选，而且可同时测定多个检测体的简便的抗坏血酸的定量方法。

主权项

1、抗坏血酸的定量方法，该定量方法是利用对由还原型抗坏血酸和氧气生成氧化型抗坏血酸和过氧化氢的反应进行催化的抗坏血酸氧化酶—以下称为ASOD—定量试样中的抗坏血酸，其特征在于包括以下步骤：(1)在水溶性介质中，ASOD存在下，由还原型抗坏血酸和氧气生成氧化型抗坏血酸和过氧化氢的反应和在过氧化物酶存在下使生成的过氧化氢和下列通式(I)或通式(II)所表示的色源体反应而生成色素的反应在同一反应体系中进行的步骤(2)预先用已知量的还原型抗坏血酸做成校正曲线的步骤，(3)通过与该校正曲线进行比较，定量生成的色素的步骤，通式(I)通式(II)通式(I)及通式(II)中，Y表示氢原子或通式(III)基团：式中Z表示氧或硫、X表示氢、烷基、链烯基、芳基、单取代氨基或非取代氨基；R¹表示羟基、单或二取代氨基或非取代氨基；R²表示氢、羟基、烷基、烷氧基、芳基、链烯基、单或二取代氨基或非取代氨基；R³、R⁴、R⁵及R⁶相同或不同，表示由氢、烷基、链烯基、烷酰基、芳酰基、芳基、卤素、硝基、磺基、羧基、羟基、烷氧基、通式(IV)、通式(V)、通式(VI)、通式(VII)、通式(VIII)、表示的基团，通式(IV)～(VIII)中，A¹表示亚烷基、A²表示氢、羟基、烷基、烷氧基、芳基、链烯基、脂环式烷基、单或二取代氨基或非取代氨基，B¹、B²、B³、B⁴、B⁵及B⁶相同或不同，表示氢、烷基、链烯基、烷酰基、芳酰基、芳基、卤素、硝基、磺基、羧基、羟基、烷氧基或羟基取代烷基；或者，R³和R⁴或R⁵、R⁶也可以一体形成亚烷基；J表示由氧、硫、通式(IX)或通式(XI)表示的基团：通式(IX)及通式(XI)中，R⁷及R⁸相同或不同，表示氢、烷基或链烷基。